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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：请帮忙看看空比色皿的吸光度值对不对，能不能用？

浏览0 回复14 电梯直达
onisaku
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发表于：2006/10/08 11:38:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 未解决
第一次用分光光度计，岛津UV2550，6个石英比色皿
使用光度测量，选择440波长，暗室内不放任何东西，点AUTOZERO
然后在样品池分别放入5只不同的比色皿，测得吸光度值为
  1    2      3    4      5
0.057 0.087  0.059 0.064  0.077

在5只比色皿中加入纯水，再依次测得吸光度值为
  1    2      3    4      5
0.027 0.038  0.027 0.029  0.038

问题如下：
1、以上吸光度值是否偏大？比色皿能用否？选择哪只用作测量比较好？
2、加入纯水吸光度变小是否正常？
3、有一次，将2只比色皿装满纯水，放入参比池和样品池，AUTOZERO后吸光度为0，然后交换样品池和参比池的比色皿，发现吸光度又不为0了，为什么？
4、在参比池放空白试剂同时在样品池放样品进行测量，和单独用样品池测完空白值再测样品然后减掉空白值，2种方法对最终结果有什么区别？

以上问题请各位不吝赐教为感


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2006/10/8 11:49:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
数值是够大的！在可见光下不必非用石英比色皿，用普通光玻璃的即可。比色皿是否干净，试样是否污染比色皿，如果经常用铬酸洗液清洗，不建议在可见光下用石英比色皿。在比色皿上作标记。
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ycjlzxj1
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2006/10/9 0:28:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该说不能用！！比色皿要一一清洗后，装上参比溶液作配对！！如最大最小相差0.005A，应更换比色皿。
清洗时，用普通香皂擦在棉花上擦洗比色皿光面多次，用蒸馏水冲净就可。
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isomer
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2006/10/9 0:31:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
440nm  0.027差不多。
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mqj23957197
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2006/10/9 8:48:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
石英比色皿一般都是两个一对，两个一对使用的，一般不同时使用六个．我发现你那里面有配对性好的石英比色皿．
而且最好在装有纯水的情况下配对．这样避免比色皿表面出现的水雾层干扰．
另外石英比色皿有一个使用方向的问题，在毛玻璃面的顶部一般有一个箭头．
（我这些也是在坛子里学到的，谢谢．）
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hyf3153
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2006/10/9 11:01:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同意2楼、4楼的看法。
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2006/10/9 15:21:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 onisaku 发表:
问题如下：
3、有一次，将2只比色皿装满纯水，放入参比池和样品池，AUTOZERO后吸光度为0，然后交换样品池和参比池的比色皿，发现吸光度又不为0了，为什么？

实际上，比色皿不仅有配对的说法，还有方向的说法。
如果把同一个比色皿的方向颠倒，会出现吸收值不一样的现象。是因为比色皿在加工后及使用中会出现：在光路中并不完全垂直于光，总会有那么一小点偏差的，而两个壁的偏差也很难一致的。
所以在使用比色皿时，特别是多个样品时，一定要注意测定时比色皿的方向一致。
同样在调零后，测定结束前，就不要把参比池取出，以免造成不必要的误差/错误。
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tianru的爸爸
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2006/10/9 15:24:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 onisaku 发表:
问题如下：
2、加入纯水吸光度变小是否正常？

加入纯水后吸收值变小是正常的：因为光在通过玻璃/水的界面与玻璃/空气的界面的透过率是不一样的。
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tianru的爸爸
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2006/10/9 15:32:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 onisaku 发表:
4、在参比池放空白试剂同时在样品池放样品进行测量，和单独用样品池测完空白值再测样品然后减掉空白值，2种方法对最终结果有什么区别？

两种方法对最终结果的差别不大，但对计算时的含义不一样，换句话就是计算方法有差异，但结果差别不大。
如果用参比池放空白试剂测定的结果一般要比单独用样品池测定的小，在反应到标准曲线上是：标准曲线的截距不一样，而斜率是一样的（这只是理论上的结果）；经过计算结果是一样的。但实际测定时不可能完全斜率一样，所以结果是基本上相同。

倒是要注意，如果吸收值过大，就不要用“单独用样品池测定”；
同样，如果吸收值本身就很小，就不要用“用参比池放空白试剂测定”；
原因就是过大的吸收值本身在测定时的准确度不高，而过小的吸收值会降低结果的精确度。
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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新手级： 新兵
2006/10/9 15:35:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 onisaku 发表:
第一次用分光光度计，岛津UV2550，6个石英比色皿
使用光度测量，选择440波长，暗室内不放任何东西，点AUTOZERO
然后在样品池分别放入5只不同的比色皿，测得吸光度值为
  1    2      3    4      5
0.057 0.087  0.059 0.064  0.077
在5只比色皿中加入纯水，再依次测得吸光度值为
  1    2      3    4      5
0.027 0.038  0.027 0.029  0.038
问题如下：
1、以上吸光度值是否偏大？比色皿能用否？选择哪只用作测量比较好？

六个比色皿，有五个值，好象少一个。
现在这五个，可能1、3、4是配对的，2和5是配对的，最好按照配对方法测试，然后配对使用。
配对方法在本论坛很容易找到的。
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cdjiashi
cdjiashi
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2006/10/9 21:35:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
wo ye xiang wen
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