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主题：【求助】SPE 萃取血浆,总是堵. 如何解决?

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wqrwxm
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发表于：2015/08/28 03:36:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
SPE 规格是 3mL 35mg.
250uL 的血浆加2mL 缓冲液混匀之后上样. 结果有的SPE柱堵的非常严重. 血浆样品即使加高负压也不能透过SPE柱.
药物含量很低,不能再减少血浆体积了.
请问,哪位大侠知道如何解决这个"堵"的问题?
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2015/8/28 8:08:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
血浆属于比较复杂的基底，这个单用SPE柱可能不一定能把杂质除得干净，可以考虑用GPC，就我们用SPE柱的感觉，很可能造成堵的原因是血浆里的物质把上筛板给糊住了，因为不知道您用的是什么SPE柱，不知道能不能扣掉上筛板试试过柱效果（上筛板起来把样液均匀分配的作用，没有上筛板的话，加样要慢点。以免填料被冲开）
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cboy
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2015/9/21 11:51:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在SPE柱管里塞点棉花试试
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m3308533
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2017/10/15 7:44:49 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
血清哪有直接上柱子的，一般先高速离心然后蛋白沉淀后再高速离心，稀释后上样
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荆棘鸟
zongguitang
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2017/10/23 21:26:28 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般操作时加缓冲液然后离心，如果药物和蛋白有结合或者能进入红细胞，可以通过超声波振荡、加乙腈等有机溶剂、硫酸锌-亚铁氰化钾等无机盐，或者酸破坏然后再离心除去蛋白再进行固相萃取操作。
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