主题:【分享】凝胶色谱柱使用注意事项

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荷花仙子
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原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡,必须重装,因为气泡会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的分子从这些空隙通过,搅乱洗脱液的洗脱次序,降低分离效果。
怎么确定色谱柱内有没有气泡存在
yifan1117
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原文由 荷花仙子(v2975525) 发表:
怎么确定色谱柱内有没有气泡存在
防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此,为了防止气泡进入色谱柱,一定要使用经过脱气的流动相,并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝,观察是否有溶剂渗出;b.如有溶剂渗出,即可将色谱柱接到管路上,以避免气泡的进入;c.如无溶剂渗出时,表明色谱柱的此端已经进去空气了,此时,可将色谱柱的出口端接到进样阀上,以流动相来反方向冲洗色谱柱,以便将柱内的空气排除。最好以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱,如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低;d.如果流出的溶剂里不含有气泡,说明柱内的气体已经被排出了,再将色谱柱以正确的方向接好,这样气泡就进不到色谱柱里面了。
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