这里要特别强调的一点是:分离效果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系。不
同厂家生产的硅胶可能含水量以及颗粒的粗细程度,酸性强弱不同,从而导致产品在某
个厂家的硅胶中分离效果很好,但在另一个厂家的就不行。溶剂的含水量和杂质含量对
分离效果都有明显的影响。温度对分离效果影响也很明显。我们实验室没有空调,我在
实验过程发现,在夏天分离相同的产品,所需的淋洗剂极性要比在冬天小很多,这一点
大家也是可以理解的。
鉴于此,使用的硅胶,不用时一定要密封,防止吸潮。TLC所用的硅胶板一定要保存
在干燥器里面,或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。
在利用TLC跟踪反应时,在点板的时候往往是反应体系的混和溶液点一个点A,每种
难挥发的原料各点一个点B,C, D等等,然后所有的原料和反应体系的混合溶剂再共同点
一个混合点X,这些点在板上的位置如图所示:
A X B C D
这样的好处是展开后可以清楚地看见每个点的位置,把A这个点展开后的各个层份的
点与B,C,等原料比较,从而判断原料消失没有,点混合点X的目的在于,方便观察,因为
有时候,板展开后,各点的位置有些变形,或者由于边缘效应等等,使得判断不易。
利用TLC判断物质的纯度时,往往要和NMR相结合,因为某种样品在这种展开剂中只
显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。但有趣的是,由于H NMR可鉴别
的纯度也就在95%左右,有时候H NMR现示较纯的东西,一点板就会发现有几个点。所
以,两者要结合使用。但是自己以前的样品,则可以只通过点板来判断纯度。
总结的不错,挺全面的。请问楼主,转自何处?
纠正以下几个错误:
(1)“硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右”,柱长一般根据样品量和分离难度确
定。
(2)“最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装
的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”,一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例
再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。“,用水
泵或气泵抽就行了,上面加压下面抽不易操作也没必要。
(3)“湿法较方便,熟手一般采用此法”,上样方法根据样品性质和数量选择,大量固
体样品用干法(伴样法),与生熟无关。
(4)“由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到
的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍”,如果使用手工铺的TLC摸
条件,则不必将洗脱剂的洗脱强度减小一倍,这种说法仅适用于使用预制高效板
(HPTLC)的情况。
(5)“对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质,在展开剂里往往加一点点三乙胺,
氨
水,吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。当然,选择所添加的碱性物质,还必须考虑容
易从产品中除去,氨水无疑是较好的选择”,这应区分是柱层还是TLC,对于柱层添加二
乙胺比较好,对于分析TLC添加三乙胺或用氨水薰(不是加到展开剂里)都可以。
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上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例
再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在
把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀
释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。
如何稀释?
稀释一倍”这种说法不太准确,应该说使洗脱强度减小一倍,适用于TLC板比柱子分辨率
高的情况。
举例:正相层析,乙酸乙酯:己烷=1:5,改为1:10;
反相层析,甲醇:水=1:2,改为1:4。
何谓正相,何谓反相啊?正相:普通的硅胶吸附层析,大极性的物质保留时间长;反
相:填料硅胶表面被修饰,小极性的物质保留时间长。
由于H NMR可鉴别的纯度也就在95%左右。5%以下很难看到峰。
为什么试极性的时候,不试CH2Cl2? 也试呀。