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主题：万能显微镜,荧光染色照相问题

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amease

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发表于：2006/12/05 16:19:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

该帖子已被shaolin设置为精华；

我们的显微镜还没有换数码相机,很郁闷，每次拍照的时候,暴光度调不好,出来的照片就不清晰，好像有一层雾,都用光了n个胶卷了.显微镜是蔡斯的那位高手有好的办法,给我发过一份来，小弟在这里先谢了.

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2006/12/5 20:03:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这是一个典型不专业配套或奸商行为的例子. 作为荧光显微镜就应该在相关相机上采用点测光装置. 现在只有亡羊补牢, 废了原来的相机,换数码的. 提醒一句, 数码的一定要制冷的, 否则噪声大, 拍不了荧光

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amease

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2006/12/6 8:49:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢了我也想换,就是上面没钱,哈哈

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mercviss

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2006/12/19 16:27:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

图象起雾可能是暗室内背景光太大, 聚焦偏离,以及曝光过度等情况引起. 部分样本本身因为厚度较大,焦外的杂散光较多也会引起起雾的情况.可以通过软件处理一定程度上减轻
如果采用数码CCD拍摄的话,建议使用单色的CCD,会有更好的解析度及敏感度.

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caicai01

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2006/12/20 11:00:00 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主真是有米啊
为什么都要用相机拍呢，用PMT不好么？

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hbchendl

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2006/12/25 12:10:00 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在控制相机曝光的面板上找“expose adj”的调整按纽，它的调整范围是...-3，-2，-1，0，+0.5，+0.25，...
实际上就是缩短曝光时间或延长曝光时间。
拍摄荧光照片时要缩短曝光时间，一般至少要缩短到正常曝光时间的1/4。
楼主看到照片的现象实际上是曝光过度的表现。荧光照片的效果应该是没有荧光物的地方一片黑，有荧光的地方不能过度，绿色的荧光不能照出黄色甚至白色来。

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2006/12/27 15:09:00 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢我不是太懂,正常曝光时间怎么知道的，?

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2006/12/31 17:44:00 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hbchendl 发表:
在控制相机曝光的面板上找“expose adj”的调整按纽，它的调整范围是...-3，-2，-1，0，+0.5，+0.25，...
实际上就是缩短曝光时间或延长曝光时间。
拍摄荧光照片时要缩短曝光时间，一般至少要缩短到正常曝光时间的1/4。
楼主看到照片的现象实际上是曝光过度的表现。荧光照片的效果应该是没有荧光物的地方一片黑，有荧光的地方不能过度，绿色的荧光不能照出黄色甚至白色来。

谈何容易, 目测视野中最亮点或感兴趣点的亮度不是一天两天的事, 盲目地设定调整值对不同类型的荧光样品不可靠, 活细胞样品更不允许不同参数照几次.

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