主题：【第十一届原创】【检测故事】我的草鱼中沙星类药物残留检测故事

                  【活动】【原创中秋测】我的草鱼中沙星类药物残留检测故事项目名称
项目名称： 恩诺沙星  、 环丙沙星  ；仪器：液相色谱-串联质谱仪；
样品前处理：称取2.0 g试样(精确至0.01g)于50 mL离心管内，加入20 mL乙腈和5 g左右无水硫酸钠，均质提取30 s，振摇，将离心管置于离心机内以4000 r/min的速度离心5 min，上清液转移至150 mL梨形瓶中，加入适量异丙醇，40 ℃下减压旋转蒸发至干，后用2.00 mL乙腈水(1+9)(含0.1%甲酸)溶液和2.00 mL乙腈饱和正己烷涡旋洗脱，于高速离心机中15000 r/min离心5 min分层，取下层清液用0.22 μm有机滤膜过滤，上机测试。

仪器条件：色谱柱：菲罗门 kinetex C18柱（100×2.1mm2.6um）流速：0.2mL/min；柱温：40℃；进样量：20μL；
流动相：A：0.1%甲酸水；B：甲醇    梯度洗脱  Iron Source：ESI+；检测方式：MRM多反应监测；

Time(min)	0.0	6.0	9.0	9.1	15
B%	13	90	90	13	13

标准曲线配制：


混标1.0ng/mL的MRM图：

样品空白：


草鱼样品：

该样品沙星类药物残留（以恩诺沙星与环丙沙星之和计）：（18.32+2.39）*2.0/2.0=20.7(ug/kg)(超标了，样品指标为不得检出)
质控：吸取标液（20ng/mL）0.25mL，相当于2.5μg/kg，最终理论浓度为2.5ng/mL，回收率为：恩诺沙星为103.2%；环丙沙星为82.4%

结论：
1、本文前处理与标准区别：GB/T 20751-2006采用乙腈提取，提取液经液液分配脱脂后，以强阳离子固相萃取小柱净化，乙腈-甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱检测，基质加标曲线定量；GB/T 20366-2006采用2%甲酸-乙腈提取，提取液用正己烷净化，乙腈-2%甲酸溶液梯度洗脱分析，标准溶液曲线定量；SN/T 1751.2-2007用1%乙酸的乙腈溶液提取，正己烷净化；GB/T 21312-2007采用EDTA-Mcllvaine缓冲液提取，HLB固相萃取柱净化，基质加标标准工作曲线外标法定量；农业部1077号公告-1-2008用酸化乙腈提取，正己烷净化，标准工作曲线内标法定量；本实验喹诺酮类药物经乙腈提取，提取液经乙腈饱和正己烷净化，乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱分析，基质加标曲线定量。
2、加入乙腈后再加入无水硫酸钠，以防其遇水结块，影响均质效果；
3、 可加入适量的二氯甲烷或异丙醇再浓缩，以防出现暴沸；
4、 2.00 mL 10%乙腈水(0.1%甲酸)溶液+2.00 mL乙腈饱和正己烷，涡旋洗脱，离心后如发生乳化现象较严重，可再加入适量乙腈饱和正己烷净化；
5、恩诺沙星定量离子对选择360/316，环丙沙星定量离子对选择332/288；
6、水产品的养殖业滥用抗生素类药物的现象还是有的