主题:【第十二届原创】HPLC在中药质量控制中的应用

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HPLC在中药质量控制中的应用



高效液相色谱法具有压力高、流速快,柱效高、高灵敏度、色谱柱可反复使用、测定样品量少并且消耗少,易回收等特点。高效液相色谱采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。见下图。


反相高效液相色谱的键合相表面是由极性很小的烃基组成,主要有C18或ODS。反相键合相色谱的洗脱液大多采用甲醇、乙腈等强极性溶剂或无机盐缓冲溶液。键合相表面的官能团不易流失,可以在很大范围内调整溶剂极性,由反相键合相色谱派生的反相离子对色谱法与离子抑制色谱法,可以很好的分离有机酸、有机碱和有机盐等离子化合物,扩大了应用范围。
1.HPLC在中药原药材中的应用
在中药制剂杂质干扰检查中的应用,中成药成分复杂,药味多,成分直接相互干扰,采用高效液相色谱法研究时必须去掉中成药中含被测成分的杂志,制成模拟样品,然后再按供试药品的方法进行提取、分离等操作,在拟定好的条件下进样分析,无干扰峰方可确证所建立的定量方法符合要求。
2.高效液相色谱法测定中药复方制剂中有效成分含量的研究
HPLC在中药成分的采收、加工处理、成分鉴别、含量测定等方面已有大量的工作报道。文献报道贺贤国等人从中华五味子中分离得到了3种成分,分别是五味子甲、五味子乙、五味子丙,解决了薄层层析实验中3种成分无法分开,只出现一个斑点以及药理实验过程中出现的毒性不稳定的问题。张红、贺贤国等对早期HPLC在中药研究中的应用。中国医学科学院、协和医科大学药物研究所开展了中药高效液相色谱分析与质量评价的系列研究,完成了80个中草药的高效液相色谱分析,丰富了中药指纹图谱
生物碱在植物界分布较广,结构复杂,种类多样,大多具有生理活性的生物碱往往是许多中草药及药用植物的有效成分。汪秀月利用HPLC法测定消糜栓中苦参碱的含量。消糜栓是近年来研制的一种新型妇科外用专用药,在含量测定中必须要检测消糜栓所含有的药用辅料对测定无干扰。实验表明HPLC法测定其含量属性和准确性均好,测定中药生物碱类成分完善。可以作为检测消糜拴质量标准的参考。
    中药何首乌及制何首乌中主要含有蒽酮类活性成分。郝晓花等人在以前的基础上,改变了过去需要花费较长的测定时间、处理样品比较复杂等诸多缺点的含水反相液相色谱法,而是采用非水RP-HPLC法,测定活性葱酮类成分在血浆中的含量。如此运用HPLC就可以缩短分析时间,色谱峰对称。
黄酮类化合物广泛存在于自然界中,在植物体内大部分与糖结合成苷,一小部分以苷元形式存在。异黄酮成分可作为评价葛属植物质量的参考依据。张淑萍等采用RP-HPLC法,利用梯度洗脱,进一次样即测定3种异黄酮成分的含量。结果表明中药葛花中3种异黄酮成分中的1种与其余2种含量差异较大,为评价中药葛花的质量提供了重要参考依据
香豆素是植物体内存在的一类具有C6-C3基本骨架的化学成分,由酪氨酸衍生而来,是一些天然药物的指标活性成分。陈琳等利用Agilent 1100高效液相色谱仪、Agilent DAD检测器,测定不同产地秦皮药材中5种香豆素的含量。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素和6、7二甲氧基—8羟基香豆素平均回收率分别为100.1%(RSD=2.9%),101.0%(RSD=2.4%),100.4%(RSD=2.6%),102.1%(RSD=3.9%),100.8%(RSD=1.7%),此方法简便可行,重现性好,为评价不同产地秦皮的质量提供了依据。
参考文献
1.    白梓静,齐广才,等. 高效液相色谱法测定中药复方制剂中有效成分含量的研究.延安大学,2012(6)
2.    杨军.时珍国药研究.江苏省中医院,1998,9(2):126.
3.    贺贤国.植物学报,1978, 20(1):77
4.    J.Rosen, K.E. Hellenas, Analysis of acrylamide in cooked foods by liquidchromatograpy tandem mass spectrometry, Analyst 127 (2002) 880-882.
5.    汪秀月.HPLC法测定消糜拴中苦参碱的含量.安徽医药,2010, 14 (7) :778-779
6.    郝晓花,蒋晔.等.非水反相液相色谱法测定大鼠虎杖给药后血浆中大黄素、大黄素甲醚的含量.中成药,2005, 27 (4) :453-455
7.    张淑萍,贺云,刘柏涛.RP-HPLC测定野葛花中3种异黄酮.分析试验室,2006, 25 (2) :74-76
8.    陈琳,刘丽梅,王瑞海.HPLC测定不同品种秦皮药材中香豆素类成分.中国中药杂志,2008, 33(23):2858-2860
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