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主题：【已应助】请问有做蛋白柱或者用过蛋白柱来分析的吗

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feifan1028
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发表于：2020/02/23 14:05:25 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我发现在蛋白柱的使用过程中不是很稳定，做出来的新蛋白柱放一段时间后，其分离度会有个先高后低的现象，有谁能告诉我这是为什么呢
另外在分析过程当中，如果使用一定比例的有机溶剂之后，压力都会有一定的上升，有没什么方法可以解决这个问题呢？
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2020/2/23 14:10:57 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的原因可能是由于蛋白分析中有机相提高蛋白在色谱柱内沉淀，所以柱压上升，导致色谱柱的分离度不理想。解决办法是：
通常先要以各添加了0.1%三氟乙酸的水/乙腈（大约90%水相至100%有机相）梯度淋洗（前题是C18的反相蛋白分析柱。）
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