最近在做生姜糖蛋白的提取纯化，看了很多文献，都要用到DEAE-52纤维素纯化，想问一下大家收集管数应该按照什么计算，是按照柱体积吗，多少个柱体积为一管呢？
目前洗脱条件如下：上样浓度50mg/ml，上样量1ml，柱子规格16mm×20cm，洗脱液0.2mol/L Tris缓冲液(含0.1mol/LNaCl),pH7.8,每10ml一管进行收集，共收集50管，在1-5管处有蛋白和多糖共同的洗脱峰。

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2022/5/16 11:22:25 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你这条件这么惨烈吗？还是2022年吗？这做出的数据还能用吗？？？

，不说AKT，简单的蛋白检测仪总要连接一个吧，或者不行自己简单组装个UV也行啊，，，，你这一管一管的接，每次上的样品出来时间都不一致。收集体积按照柱体积和上样量来大致估计就可以，一般都是通过时间、泵速来控制收集体积..........你这个条件....诶，，，加油吧少年

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2022/5/16 21:51:58 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
你这条件这么惨烈吗？还是2022年吗？这做出的数据还能用吗？？？，不说AKT，简单的蛋白检测仪总要连接一个吧，或者不行自己简单组装个UV也行啊，，，，你这一管一管的接，每次上的样品出来时间都不一致。收集体积按照柱体积和上样量来大致估计就可以，一般都是通过时间、泵速来控制收集体积..........你这个条件....诶，，，加油吧少年

我们有纯化多糖的，都是这样做

蛋白纯化仪我不是很懂，请问那个上样量多吗？

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2022/5/16 22:04:50 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Ins_959c8fab(Ins_959c8fab) 发表:
我们有纯化多糖的，都是这样做蛋白纯化仪我不是很懂，请问那个上样量多吗？

查了一下我们学校确实有这个仪器，可以用来纯化糖蛋白吗？

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2022/5/17 10:12:41 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Ins_959c8fab(Ins_959c8fab) 发表:
查了一下我们学校确实有这个仪器，可以用来纯化糖蛋白吗？

蛋白检测仪是一个可以用来实时检测蛋白含量变化的一个仪器，一般手动装柱做蛋白层析用，泵、层析柱、蛋白检测仪链接，及组成了一套基本的层析系统，通过观测蛋白检测仪的数值变化选择收集流穿液（洗脱液），不然想你那样接个几十管，然后还要每管去测一下，搞死人不说，稳定性准确性都差了；AKT是层析系统，主要用来做蛋白纯化，所以也叫蛋白纯化系统，这个你有兴趣自己百度去了解下吧，

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2022/5/17 10:13:02 Last edit by Ins_eedcdc41