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试剂盒中容易受到反复冻融影响的成分为引物和探针,多次的反复冻融确实会影响实验结果。根据以往数据统计[16],反复冻融次数在21次以内,Ct值差异不显著。冻融次数大于21次时,结果差异明显。因此在试剂盒的使用过程中,尽量避免过多的反复冻融,有条件下尽量在冰盒上操作,并及时放归冰箱冻存。