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问题描述:
250uL的血浆加2mL缓冲液混匀之后上样,结果有的SPE柱堵的非常严重,血浆样品即使加高负压也不能透过SPE柱,药物含量很低,不能再减少血浆体积了,如何解决"堵"的问题?
解答:
(1)血清不能直接上柱子,一般先高速离心然后蛋白沉淀后再高速离心。
(2)一般操作时加缓冲液然后离心,如果药物和蛋白有结合或者能进入红细胞,可以通过超声波振荡、加乙腈等有机溶剂、硫酸锌-亚铁氰化钾等无机盐,或者酸破坏然后再离心除去蛋白再进行固相萃取操作。
以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》