主题:【已应助】求助,两个相似化合物保留时间一致,峰分离不开

浏览0 回复4 电梯直达
Ins_4b5c3543
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现在在用Waters 2695,2475荧光检测器
流动相用的是甲醇:乙腈:0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(ph5.0)=10:5:85 柱温是35℃
更改了流动相配比,更改盐的ph等条件后,两个化合物的保留时间始终一致
我接下去该怎么尝试?
这是分不开的两种化合物,可以尝试梯度分离吗?
推荐答案:歌名回复于2022/12/28
换个T3 的柱子,然后流动相使用甲醇和乙酸铵试试简单梯度看看,甲醇其实比例可以稍微高一点点
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歌名
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换个T3 的柱子,然后流动相使用甲醇和乙酸铵试试简单梯度看看,甲醇其实比例可以稍微高一点点
houjjun
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xiaolanzi5
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首先要判断您目前的保留时间处是不是真的目标物峰(有点怀疑)。需要分别进单标,做曲线看是不是成比例。从结构式看,这两个应该能分开,同分异构都能分开,您这两个物质虽然结构相似,但极性还是有差别。还有在您目前的有机相15%的等度条件下,“保留时间”是多少?目前的有机相比例比较低,没必要走梯度。另,缓冲盐是您优化后必须要加的吗?开发方法是能简尽简,从不用缓冲盐开始做方法开发。
hujiangtao
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