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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】液相小白，峰形怎么是这样，是什么原因呀

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Ins_99e4795e
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发表于：2023/03/23 21:22:17 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
刚开始用液相，在测试方法。流动相（甲醇：水=75：25），波长221nm，用氢氧化钠助溶的待测物，这个峰形像个鼓包，但是面积大小跟我的待测物浓度相符，不知道是什么原因，求大佬指导一下

推荐答案：xiaolanzi5回复于2023/03/24
也许是氢氧化钠的问题，待测体系与流动相差太大了。
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Ins_eedcdc41
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2023/3/24 9:59:08 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品换个助溶剂再来看下，氢氧化钠碱性太强，进样不合适，也会导致PH变化
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2023/3/24 9:59:33 Last edit by Ins_eedcdc41
xiaolanzi5
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2023/3/24 20:53:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也许是氢氧化钠的问题，待测体系与流动相差太大了。
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Ins_99e4795e
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2023/3/26 16:41:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
样品换个助溶剂再来看下，氢氧化钠碱性太强，进样不合适，也会导致PH变化
我一开始觉得是ph的问题，昨天用甲醇：1%乙酸 ph为2.7=75:25试了一下，根本都没出峰，沮丧

文献里是用1%磷酸但是师兄说磷酸盐比较伤柱子，所以想用乙酸代替，结果没有峰，这个鼓包峰会不会是氢氧化钠的峰呀
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dadgoh
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2023/3/26 18:41:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先尝试梯度洗脱，再考虑PH值影响。
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Ins_99e4795e
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2023/3/26 21:21:20 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:
先尝试梯度洗脱，再考虑PH值影响。
我一开始觉得是ph的问题，昨天用甲醇：1%乙酸 ph为2.7=75:25试了一下，根本都没出峰，沮丧

文献里是用1%磷酸但是师兄说磷酸盐比较伤柱子，所以想用乙酸代替，结果没有峰，这个鼓包峰会不会是氢氧化钠的峰呀
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安平
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2023/3/27 21:27:31 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主具体分析什么物质？

具体使用什么色谱柱？

样品使用什么溶剂？

样品的待测物质浓度可能有多少？

酸是如何添加的？添加了多少？样品的pH值有多少？
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安平
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2023/3/27 21:29:24 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般的C18柱，不耐碱。pH过高会造成硅胶基质的溶解，损坏色谱柱。
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houjjun
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2023/3/28 13:04:54 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱和流动相不兼容吧，选根耐碱性的色谱柱
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陈漠寒
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2023/3/28 14:40:58 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氢氧化钠碱性强了，调PH试试
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