巴比妥酸（BA）又称丙二酰脲或2,4,6-嘧啶三酮，硫代巴比妥酸（TBA）又称为4,6-二羟基-2-巯基嘧啶或丙二酰缩硫脲，二者均可用作化学分析或生化试剂、塑料和染料及巴比妥类药物、维生素B₁₂等药品的的中间体，在实验室和制药企业应用广泛，均溶于热水，在水溶液中BA和TBA均离解成阴离子状态。SH-AP-2型阴离子色谱柱是青岛盛瀚色谱技术公司开发生产的一款疏水型、碳酸盐分离体系阴离子色谱柱。曾成功应用于BrO₃^-、ClO₃^-、ClO₂^-、ClO₄^-、BA、TBA、三氯乙酸等成分的测定。现将BA和TBA在SH-AP-2型阴离子色谱柱上色谱特性总结分析如下：

1、BA在不同淋洗条件下的峰分离度及其与各组分的分离情况：试验结果见表1，从表1可见，随着淋洗液中NaHCO₃浓度的增加,BA的峰分离度（R）从3.97缓慢下降至3.16,但仍在1.5以上，当以6.0mmol/LNa₂CO₃-1.0mmol/LNaHCO₃溶液为淋洗液，流量为0.80ml/min等度洗脱，BA的保留时间在12min以内（在此条件下，TBA在120min内没出峰），色谱峰介于NO₃^-与H₂PO₄之间，属于弱保留组

表1 淋洗液配比对BA等组分峰分离度（R）的影响（流量0.80 ml/min，柱箱温度35℃）

组分	Na₂CO₃+NaHCO₃（mmol/L）
组分	6.0+0	6.0+0.9	6.0+1.0	6.0+1.1	6.0+2	6.0+3.0
NO₃^-	2.02	1.61	1.53	1.54	1.27	1.08
BA	3.97	3.75	3.57	3.48	3.55	3.16
H₂PO₄	二者合并为一个峰	1.47	1.63	1.62	2.27	2.88
SO₄^2-	二者合并为一个峰	/	/	/	/	/

图1 BA与常见阴离子色谱图

（6.0mmol/LNa₂CO₃-1.0mmol/LNaHCO₃，流量0.80 ml/min，柱温35℃）

分，并能与F^-、Cl^-、NO₂^-、Br^-、NO₃^-、H₂PO₄^-和SO₄^2-等7种无机阴离子完全分离，

且峰形良好，见图1。

2、TBA在SH-AP-2型色谱柱上的色谱特性：当以15.0、20.0、25.0和30.0 mmol/L的Na₂CO₃溶液为淋洗液时，TBA的保留时间（T）分别为49、39、31和28min多钟（可见在SH-AP-2型色谱柱上TBA属强保留组分），峰面积及半峰宽逐渐降低，峰高基本保持不变，试验结果见表2。

表2 TBA在SH-AP-2型色谱柱上洗脱试验结果（流量0.80 ml/min，柱温35℃）

Na₂CO₃溶液浓度（ mmol/L）	T/min	S	H	半峰宽
15.0	49.633	907129	8175	104.207
20.0	39.179	570446	8085	73.155
25.0	31.414	531245	8074	61.719
30.0	28.207	479141	8070	55.758

有机改性剂丙酮对TBA色谱特性的影响：当在25.0mmol/L的Na₂CO₃溶液中加入20%的丙酮时，TBA的保留时间明显缩短，从31.414min缩短为18.762min，峰高及峰面积明显增加，分别增加了213%和96%，半峰宽显著降低，从61.791下降至38.799，峰型明显改善，试验结果见表3。

表3丙酮对TBA色谱峰参数的影响（流量0.80 ml/min，柱温35℃）

25.0mmol/LNa₂CO₃溶液中丙酮浓度（V/V）	T/min	峰面积比	峰高比	半峰宽
0	31.414	1.000	1.000	61.791
20.0	18.762	1.968	3.135	38.799

4、TBA与常见阴离子及BA的分离情况：当以25.0mmol/L的Na₂CO₃-20%丙酮溶液为淋洗液时，柱温35℃，流量0.80 ml/min等度洗脱，TBA可与F^-、Cl^-、NO₃^-、H₂PO₄^-、SO₄^2-、BA完全分离（NO₃^-、H₂PO₄^-、SO₄^2-和BA四者合并为一个峰），

图2 TBA与常见阴离子及BA分离色谱图

（25.0mmol/LNa₂CO₃-20%丙酮溶液，流量0.80 ml/min，柱温35℃）

TBA的色谱峰在SO₄^2-之后，属强保留组分，见图2。

5、线性方程、线性范围与检出限：在上述相应最佳条件下，BA和TBA色谱峰面积(y)与其质量浓度(x)分别在0.10～20.0mg/L和0.05～40.0mg/L范围内呈良好的线性关系，相关系数r均为0.9999，检出限（3N/b）分别为0.06mg/L和0.025mg/L，结果见表4。

表4　BA和TBA的线性范围、回归方程、相关系数和检出限

组分	线性范围/mg/L	回归方程	相关系数/r	检出限/mg/L
BA	0.10～20.0	y=34990x-2426	0.9999	0.06
TBA	0.05～40.0	y=58660x-2647	0.9999	0.025

小结：（1）BA和TBA是结构、性质相似的两种化合物，一般化学方法难以将二者区分，但在适宜的淋洗条件下SH-AP-2型阴离子色谱柱能将二者与其他阴离子完全分离，且BA属于弱保留组分而TBA属于强保留组分，为BA和TBA这类结构性质相似化合物的定性、定量分析提供了依据，也为其他相似化合物的离子色谱分离提供了参考。（2）TBA的电导响应灵敏度高于BA。（3）SH-AP-2型阴离子色谱柱可用于BA和TBA的定量分析。

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图1图2.doc