(1)压力是液相色谱中最重要的指标，要关注压力及变化。

(2)保留时间的变化经常是由于压力不稳引起的。

(3)不同流动相在相同流速和温度的情况下压力是不同的（粘度有关）。

(4)记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的压力值。

1.1压力异常问题－压力高

Ⅰ、LC-20A压力高的标准是什么？

a：LC-20A 新仪器系统压力是多少？

b：流动相是什么？流速是多少？

c: 参考标准：水 1、0 MP 以下（1 ml/min）

（注：进样器和检测器之间接双通）。

注意柱子的压差（真实压力值）

Ⅱ、怎么推断压力高的部件在哪儿？（首先排除柱子或保护柱压力高）

a：顺推法。

b：反推法。

(注意检测器双通的堵塞或者管路被憋紧堵塞）

Ⅰ、首先确认是保护柱或色谱柱堵塞还是系统堵塞(不能超声保护柱芯）

Ⅱ、色谱柱堵时，选择合适的冲洗液，不建议反冲。特殊柱子以说明书为准。

Ⅲ、系统堵塞，应确认是哪一部份堵塞，由前向后或由后向前逐部件进行排除。

容易发生堵塞的部件

(1)保护柱。

(2)泵的管路过滤器和泵头管路（LC-10ATvp出口单向阀到右泵头）。

(3)混合器预混合室过滤器。（主混合器和预混合室建议不要拆洗）

(4)某些细内径的系统管路。

(5)自动进样器高压阀和细内径的出口管路（UFLC)。

(6)自动进样器的进样口到高压阀管路（LC2010)

(7)手动进样阀的定子堵塞。

(8)检测器流通池半微量池的入口管和背压管。

(9)自动进样针堵塞，（劣质进样垫）

1.建议用户使用保护柱来延长分析柱的寿命。

柱压高或者分析问题80％原因在保护柱，首先应该排除保护柱。

不建议自己为用户填补柱子。

柱子没有保修。

泵的管路过滤器堵塞更换周期半年∽1年

混合器预混合室过滤片更换周期：半年－1年

自动进样器堵塞

高压阀转子：更换周期2年

转子槽磨损掉屑造成堵塞和吸样不准。

转子10万次不漏液（PEEK制，含盐流动相缩短次数）

LC-2010 的进样口到高压阀的PEEK管

1.2液相色谱常见问题-压力零

Ⅰ、如果压力为零：

(1)泵头中没有液体，充满气泡。

(2)单向阀完全堵死。

(3)吸滤头完全堵死。

(4)排液阀没关上。

(5)管路漏液。

(6)主板或者压力传感器。

(7)泵体锈蚀，柱塞杆不动或折断。

(8)低压梯度阀滤网堵塞。

Ⅱ、如果有压力但是压力比正常时低：

(1)泵头有气泡。

(2)柱塞密封垫漏液。

(3)管路漏液。

(4)单向阀轻度堵塞。

(5)单向阀磨损。

(6)吸滤头堵塞

(7)排液阀没关紧。

(8)排液阀锣纹磨损或O圈磨损漏液

(9)传感器故障

1.3液相色谱常见问题－压力波动

Ⅰ、压力波动主要原因：

(1)泵头中有气泡。（建议甲醇赶气泡）

(2)单向阀脏、堵塞、磨损。

(3)单向阀非耐乙腈型

(4)柱塞密封垫漏液。

(5)柱塞杆磨损漏液

(6)流动相有气泡。

(7)吸滤头脏。

(8)脱气机脱气不良。

(9)泵参数值、原点位置不合适不准。

(10)泵轴承磨损。（更换压力传感器及泵体要更改参数）。

(11)LPGE不良。

Ⅱ、各型号的泵压力允许波动范围（流动相为纯水）。

1、0ml/min 日常运行标准(非安装标准):

LC-20AD : 0.2 MPa

LC-20AT : 0.3 MPa

LC-20AB : 0.2 MPa

LC-10ATvp : 0.5 MPa

LC-10ADvp: 0.2 MPa

LC-2010AHT: 0.5 MPa

超声清洗零部件步骤：

(1)纯水 15 min

(2)纯异丙醇 15 min（低极性溶剂清洗）

(3)特别脏的用5％硝酸15 min或者25％的磷酸（洗锈），再重复前面1、2 步骤。

系统管路清洗步骤-管路脏或者堵的冲洗

注意：不能接柱子！

流速： 1 ml/min

步骤	时间
(1)纯水	15 min
(2)5％硝酸或 25％磷酸	60 min
(3)纯水	15 min
(4)纯异丙醇	60 min
(5)甲醇或 50％水/ 甲醇	30 min

建议定期清洗（1∽2月一次）

2、液相色谱常见问题-漏液问题

经常漏液的部件：

(1)泵：柱塞密封垫（漏流动相）

排液阀

清洗垫（漏清洗液）

(2)手动进样器：转子密封垫

自动进样器：进样垫

样品环

(3)检测器：流通池堵塞（垫片损坏、透镜破碎）

(4)柱子接头处：（接头松动，接头磨损，接头不匹配）

3、液相色谱常见问题-基线问题

3.1基线噪音大-毛刺

基线噪音标准：

SPD-10Avp/20A 20 uv 流动相纯水 250nm

SPD-M20A 50 uv 流动相纯水 250nm 600nm

原因：

(1)流动相污染，使用低纯度溶剂。

(2)流动相、检测器流通池内有气泡。

(3)通过检测池的能量不够 (光路脏、氘灯老化、流动相、池子脏）。

(4)没接好地线。

(5)波长设定短（220nm以下）。

(6)电源电压波动几十伏。

(7)电路板故障。

(8)仪器振动。

3.2基线漂移－起伏和单向

基线漂移标准：

SPD-10Avp/20A: 600 uv /hour 纯水 250nm

SPD-M20A: 2mv /hour 纯水 250nm 600nm

原因：

(1)流动相污染，使用低纯度溶剂。

(2)检测器的温度受到环境波动（风口，空调口）。

(3)冲洗平衡柱子时间不够（半小时），柱子没恒温。

(4)柱子或管路太脏。

(5)波长设定短（220nm以下）。

(6)特殊流动相温控影响。（离子对试剂需要恒温较稳定）

(7)检测器要预热30min以上。

4、液相色谱常见问题-进样精度问题

4.1手动进样阀 7725i

CV：10ul 6针面积 RSD 1％

(1)进样量不合适（10ul）。

(2)进样针定量不准。（不熟练）

(3)进样针有气泡。（慢提快打）

(4)进样口转子针密封松动（用橡皮顶紧）。

(5)进样针太细，插不紧。

(6)转子密封垫脏、磨损、漏液。

(7)定量环堵塞。

(8)废液管堵塞或者位置不对。

(9)进样的方法不正确。

进样针用完以后要及时清洗，否则针会粘住。

4.2自动进样器

10ul 6针面积 RSD

SIL-10ADvp SIL-20A 0.3 %

SIL-10AF 模式 A 0.5 % 模式 F 1 %

SIL-10AP 1.0 %

(1)清洗液干了。（瓶子或管路）

(2)没有排气（purge）或排气时间（25min)不够。

(3)清洗液没脱气。（没有在线脱气机情况）

(4)高压阀转子密封垫堵塞或磨损。

(5)进样垫堵塞或磨损漏液。

(6)非岛津的瓶及瓶垫。

(7)针或定量环漏液或堵塞。

(8)计量泵轴承螺杆磨损。

(9)进样瓶拧得太紧。

(10)死体积。（后面有介绍）

(11)吸样速度不合适。

(12)样品稳定性（待审）

(13)DIP TIME改变了，峰形不好，积分不准确。（周建华提）

5、液相色谱常见问题-保留时间精度

保留时间重现性标准：

10ul 6针保留时间 RSD （连接色谱柱）

7725i 和自动进样器： 0.5 ％

(1)泵输液送液不正常（压力波动、气泡）。

(2)柱温的变化（室温变化小于2℃）。

(3)流动相组分挥发变化（封口膜）。

(4)流动相的PH值不同，缓冲能力不够（样品影响）（低波长用磷酸盐，普通波长用醋酸盐。）

(5)色谱柱平衡时间不够（C18,15cm 30min-60min）。

(6)梯度洗脱未回初始流动相浓度比例或时间不够。

(7)纯有机试剂与高盐流动相混合。

(8)柱子问题。

(9)低压梯度阀不良。

(10)密封垫漏液，排液阀没拧紧。