光度分析方法以其设备价格低廉、操作简便快速等优势而被基层实验室广泛应用，它伴随我走过了40余年的职业生涯，也是我开展方法学研究的主要内容，在我所发表的60余篇方法学研究论文中光度分析论文占40余篇，主要涉及萃取光度法（有机相光度法）、水相光度法、固相（树脂相）光度法，在水相光度法中包括动力学光度法、水平光路光度法和垂直光路光度法等，现就我职业生涯中光度分析方法学研究的主要内容总结于下。

萃取光度法

Cu(Ⅱ)-DPC配合物萃取光度法测定微量铜

利用在碱性介质中Cu(Ⅱ)可与DPC发生灵敏的显色反应生成不溶于水但可溶于氯仿等有机溶剂的紫红色二元配合物的原理，建立了测定微量Cu²⁺的高灵敏DPC萃取光度法，方法的Cu²⁺含量在0～9.0 μg/10 mL的范围内符合比尔定律，工作曲线的回归方程为：A=0.0102+0.1143C_{（Cu(Ⅱ)，μg）}，r=0.9996，由线性回归法求得的表观摩尔吸光系数ε₅₄₀=1.5×10⁵L·mol^-1·cm^-1，是光度法测定微量Cu²⁺最灵敏的方法之一，方法选择性良好，直接应用于天然水、汽水等样品中微量Cu²⁺的测定，获得满意的结果，研究论文在《分析化学》、《理化检验-化学分册》等核心刊物上发表^[1-2]，这是作者发表第一篇研究论文，论文发表后被国际权威刊物“SCI”、“CA”“AA”引用收录（ “CA”收录，115（2）：871，21141e，1991 ；“AA” 收录，54（3）：442，3H294，1992），表明论文有较高的学术或实用价值。

灿烂甲酚兰萃取光度法快速测定冷饮中糖精钠

利用在弱酸性介质中，灿烂甲酚兰与糖精发生显色反应形成不溶于水但溶于氯仿的蓝色离子缔合物原理，建立了灿烂甲酚兰萃取光度法快速测定冷饮中糖精钠的新方法^[3]，该方法的灵敏度高，选择性良好，操作简便快速，应用于冷饮中糖精钠的测定，结果满意。

水相光度法

催化动力学光度法测定痕量铜

利用在碱性介质中，Cu²⁺对空气氧化DPC显红色的反应有较强的催化作用，建立了测定痕量Cu²⁺的催化动力学光度法^[4]，方法Cu²⁺含量在0.05～0.25μg/27 mL的范围内符合比尔定律，表观摩尔吸光系数ε=1.0×10⁷L·mol^-1·cm^-1，方法应用于自来水、桔子水和标准水样中痕量Cu²⁺的测定，结果令人满意，研究论文在《分析试验室》、《理化检验-化学分册》等核心刊物上发表，论文发表后被国际权威刊物“CA”“AA”引用收录（“AA” 收录，55（1）：22，1D35：1993）。

2 催化动力学垂直光路光度法测定痕量铜

利用在碱性介质中，Cu²⁺催化空气氧化DPC生成二苯卡巴腙的指示反应，以酶标仪为测量仪器，以酶标板为显色容器，建立了测定痕量Cu²⁺的催化动力学垂直光路光度法^[6]，Cu²⁺含量在0～3.0 ng/250μL范围内符合比尔定律，由工作曲线测得表观摩尔吸光系数ε=1.2×10⁷L·mol^-1·cm^-1，方法应用于化学试剂氨三乙酸和标准水样中铜的测定，加标回收率在92%～95%，相对标准偏差为3.0%～4.5%（n=6）。

3 垂直光路光电比浊法测定尿微量蛋白

垂直光路光度法具有待测溶液分层、溶剂分子蒸发及试剂(标准及样品除外)的吸量误差对吸光度测量结果影响较小等许多水平光路光度法(即常规光度法)所不具备的优点.我们根据蛋白质与磺基水杨酸(SSA)发生灵敏的沉淀反应,且聚乙烯吡咯啉酮K30(PVPK30)对该反应有增敏作用,提出了以SSA为沉淀剂、PVPK30为增敏剂,用垂直光路光电比浊法测定尿液中微量蛋白质的新方法^[7]，该法应用于尿液总蛋白测定,其结果与考马斯亮蓝光度法相吻合。

4 紫尿酸/硫代紫尿酸水相光度法测定微量铁

在碱性条件下,VA与Fe(Ⅱ)发生灵敏的配合反应形成一种稳定的蓝色配阴离子,该配阴离子在620nm和350nm处各有一个正吸收峰,其ε620=1.93×10⁴,ε350=2.64×10⁴,且配阴离子在620nm和350nm的吸光度及其两者之和(A(620+350)均与Fe(Ⅱ)在0～50.0μg/29.0ml呈良好的线性关系,据此本文建立了以VA为显色剂,采用三种测量方式即分别在620nm(方式Ⅰ)、350nm(方式Ⅱ)或在两波长下(方式Ⅲ)测定微量铁的光度法^[8]，方法用于自来水中铁的测定，获得了令人满意的结果，研究论文在《理化检验-化学分册》等核心刊物上发表，论文发表后被国际权威刊物“CA”“Р.Ж.Химия”引用收录（“CA”收录：122：613，222276w，1995； “Р.Ж.Химия”收录，14г95，1995）。

在碱性介质中，铁（Ⅱ）与硫代紫尿酸反应形成一种稳定的兰色配合物，该配合物在波长658nm和384nm具有吸收峰，其表观摩尔吸光系数ε分别为2．42×10⁴ L·mol^-1·cm^-1和4．18×10⁴ L·mol^-1·cm^-1，且其吸光度A₆₅₈、A₃₈₄及其二者之和△A均与铁（Ⅱ）在一定的范围内呈良好的线性关系，据此建立了一种测定微量铁的新的分光光度法^[9]。该法铁（Ⅱ）含量在0～50．0μg／25mL范围内符合比耳定律，应用于水样中铁的测定，获得了令人满意的结果。

5 铁和钴的同时测定

利用紫尿酸与铁、钴配阴离子在365nm处的吸光度具有良好的加和性，建立了同时测定铁和钴的紫尿酸光度法^[10]。铁、钴量均在0～50.0μg/29ml范围内符合比耳定律，方法用于自来水中铁和钴的同时测定，结果分别与邻菲罗啉光度法和亚硝基R盐光度法一致，回收率分别为96%～102%和98%～104%。论文发表后获国际经济评价（香港）中心“世界华人重大学术成果”证书。

利用在碱性介质中，铁(Ⅱ)和钴(Ⅱ)可与硫代紫尿酸反应分别形成稳定的蓝色和黄色配阴离子，铁(Ⅱ)配阴离子在658 nm和395 nm具有吸收峰，钴(Ⅱ)配阴离子只有一个吸收峰位于424 nm，体系的吸光度AFe₆₅₈、ACo₄₂₄与铁、钴含量在一定的范围内呈线性关系，且铁(Ⅱ)、钴(Ⅱ)配阴离子在424 nm波长处的吸光度具有良好的加和性，在658 nm测定铁，在424 nm测定钴的质量浓度分别在0～50.0μg/25 mL和0～25.0 μg/25 mL范围内符合比耳定律^[11]，该方法应用于水样中微量铁和钴的同时测定，其结果与原子吸收光谱法相吻合，加标回收率分别为98%～104%和97%～103%，相对标准偏差(n=5)分别在1.8%～3.4%和2.2%～3.7%。

处的吸光度具有良好的加和性，在658 nm测定铁，在424 nm测定钴的质量浓度分别在0～50.0μg/25 mL和0～25.0 μg/25 mL范围内符合比耳定律^[11]，该方法应用于水样中微量铁和钴的同时测定，其结果与原子吸收光谱法相吻合，加标回收率分别为98%～104%和97%～103%，相对标准偏差(n=5)分别在1.8%～3.4%和2.2%～3.7%。

6 双峰双波长光度法测定铁

利用邻苯二酚紫和酸性铬蓝K可分别与铁(Ⅱ)和铁(Ⅲ)形成蓝色和黄色配合物且具有两个吸收峰的原理建立测定微量铁的邻苯二酚紫双峰双波长光度法^[12]和酸性铬蓝K双峰双波长光度法^[13]。

树脂相光度法测定微量铁

利用碱性条件下，铁(Ⅱ)与紫尿酸反应形成蓝色配阴离子且该配阴离子能被以苯乙烯型强碱性阴离子交换树脂完全吸附，在620nm测定树脂相的吸光度,建立了痕量铁的紫尿酸树脂相光度测定法^[14],方法线性范围为Fe(Ⅱ)0～25.0μg/29ml，其灵敏度约为水相光度法的10倍，方法用于自来水中铁的测定,结果令人满意。

在碱性介质中，铁（Ⅱ）与硫代紫尿酸反应形成一种稳定的兰色配阴离子，且该配阴离子能被阴离子交换树脂完全吸附，建立了一种测定水中微量铁的硫代紫尿酸树脂相光度法^[15]，该法铁（Ⅱ）含量在0～20.0μg/30mL范围内符合比尔定律，工作曲线的回归方程为：A=0.0600C（Fe（Ⅱ），μg）-0.0060，r=0.9999，由曲线斜率法求得的表观摩尔吸光系数ε₆₆₅=2.02×10⁵L·mol^-1·cm^-1（是水相光度法的8倍），方法应用于自来水和标准水样中铁的测定，其结果与原子吸收光谱法和标准值相吻合，加标回收率在96～104%，相对标准偏差（RSD）在1.7～4.1%（n=5）。

参考文献

1）黄选忠.高灵敏二苯碳酰二肼萃取光度法测定微量铜[J].分析化学，1990，18（3）：304

2）黄选忠.苯氨基脲萃取光度法测定微量铜[J].理化检验-化学分册，1991，27（1）：51

3）黄选忠.灿烂甲酚兰萃取光度法快速测定冷饮中糖精钠[J].分析试验室，1992，11（1）：61

4）黄选忠，吕全勇，阮刚.一种测定痕量铜的新催化动力学光度法[J].分析试验室，1992，11（2）：38

5）黄选忠.催化显色光度法测定痕量铜[J].理化检验-化学分册，1992，28（6）：343

6）黄选忠，肖国荣.催化动力学垂直光路光度法测定痕量铜[J].理化检验-化学分册，1996，32（1）：20

7）黄选忠，彭兰，吴承杰.垂直光路光电比浊法测定尿微量蛋白的研究[J].分析科学学报，2002，18（5）：438

8）黄选忠.紫尿酸光度法测定微量铁[J].理化检验-化学分册，1994，30(4):228

9）黄选忠，黄伟.铁(Ⅱ)-硫代紫尿酸显色体系的研究及应用[J].分析科学学报，2009， 25(4):490

10）黄选忠.紫尿酸光度法同时测定铁和钴[J].理化检验-化学分册，1996，32(4):227

11）黄选忠，黄伟.以硫代紫尿酸为显色剂分光光度法同时测定铁和钴[J].理化检验-化学分册, 2009， 45(12):1410

12）黄选忠，肖国荣.邻苯二酚紫双峰双波长光度法测定铁[J].中华预防医学杂志，1996，30（1）：46

13）以酸性铬蓝K为显色剂，双峰双波长光度法测定微量铁（Ⅲ）[J].山东化工，2015,44（9）：101

14）黄选忠.紫尿酸树脂相光度法测定痕量铁[J].理化检验-化学分册，1995,31(6):346-347

15）黄选忠，陈孝进，彭兰.硫代紫尿酸树脂相光度法测定微量铁的研究[J].公共卫生与预防医学，2005,16(5):61