岛津LC20A，流动相是水和乙腈从10%-50%的梯度，在之前做的实验，某个峰的保留时间在10分钟，但这两周发现这个峰保留时间一直在变化，9min，8min，最近一次实验已经到了5min，但其他的峰保留时间都没有变化，这可能是什么原因呢？这个峰的最大紫外吸收波长在365左右，柱子也是新买的，整个实验也就最近两个月做的，用了柱温箱的。

推荐答案：xiaolanzi5回复于2023/12/01

方法开发中也发现这种情况，首先看压力稳不稳，压力稳，仪器没问题的话就是该化合物与流动相不匹配导致的。通常目标物在流动相中会离子化，有时会有离子态有时是分子态，离子态在c18柱上保留弱，出峰早，分子态相对容易保留，出峰晚。当化合物的pka与流动相ph差的不大时，目标物在流动相中有时是离子态有时是分子态，这就造成保留时间的不稳定。所以要根据化合物的pka值调整流动相ph值。

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xiaolanzi5

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2023/12/1 14:19:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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安平

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2023/12/1 14:24:46 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果仅有某个组分发生问题，可能与色谱柱或流动相不良有关。

与仪器无关。

建议更换色谱柱或流动相，修改梯度洗脱程序实验。

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安平

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2023/12/1 14:25:04 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主详细描述具体的分析条件为好

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Ins_b4c321bc

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2023/12/1 14:50:15 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 安平(byron1111) 发表:如果仅有某个组分发生问题，可能与色谱柱或流动相不良有关。与仪器无关。建议更换色谱柱或流动相，修改梯度洗脱程序实验。

就是只有一个峰在变
0.01-15 min，10%-50% ACN；15.01-16 min，50% ACN；16.01-30 min, 10% ACN，30 ℃

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Ins_b4c321bc

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2023/12/1 14:50:50 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 安平(byron1111) 发表:如果仅有某个组分发生问题，可能与色谱柱或流动相不良有关。与仪器无关。建议更换色谱柱或流动相，修改梯度洗脱程序实验。

这是最近两天的

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Ins_b4c321bc

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2023/12/1 14:52:47 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:方法开发中也发现这种情况，首先看压力稳不稳，压力稳，仪器没问题的话就是该化合物与流动相不匹配导致的。通常目标物在流动相中会离子化，有时会有离子态有时是分子态，离子态在c18柱上保留弱，出峰早，分子态相对容易保留，出峰晚。当化合物的pka与流动相ph差的不大时，目标物在流动相中有时是离子态有时是分子态，这就造成保留时间的不稳定。所以要根据化合物的pka值调整流动相ph值。

压力是正常的，我前一个半月跑出来都是重复的结果，就最近两周在变。离子态会这样吗？那这个峰我是不知道结构是什么的，我要怎么去调pH呢？

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sdlzkw007

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2023/12/6 17:13:35 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

梯度洗脱结束后，需要重新平衡系统，否则容易出现类似的问题。建议你尝试一下把梯度洗脱程序设置的平衡时间长一点对比一下看看。

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2023/12/15 13:39:16 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:方法开发中也发现这种情况，首先看压力稳不稳，压力稳，仪器没问题的话就是该化合物与流动相不匹配导致的。通常目标物在流动相中会离子化，有时会有离子态有时是分子态，离子态在c18柱上保留弱，出峰早，分子态相对容易保留，出峰晚。当化合物的pka与流动相ph差的不大时，目标物在流动相中有时是离子态有时是分子态，这就造成保留时间的不稳定。所以要根据化合物的pka值调整流动相ph值。

感谢回答，在水相中加了0.1%甲酸，这个峰就尖尖的了，确实是个酸性化合物。

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xiaolanzi5

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2023/12/15 13:45:56 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Ins_b4c321bc(Ins_b4c321bc) 发表:感谢回答，在水相中加了0.1%甲酸，这个峰就尖尖的了，确实是个酸性化合物。

不错不错！

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Ins_b4c321bc

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2024/2/1 15:14:52 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:方法开发中也发现这种情况，首先看压力稳不稳，压力稳，仪器没问题的话就是该化合物与流动相不匹配导致的。通常目标物在流动相中会离子化，有时会有离子态有时是分子态，离子态在c18柱上保留弱，出峰早，分子态相对容易保留，出峰晚。当化合物的pka与流动相ph差的不大时，目标物在流动相中有时是离子态有时是分子态，这就造成保留时间的不稳定。所以要根据化合物的pka值调整流动相ph值。

我想再问一下，是题目问题的后续，我最近配了10瓶溶液，都是用固体分别配的，取的固体量不一样，但浓度大致一样，流动相加了0.1%的甲酸。液相中其他峰的强度峰面积都基本一致，但这个峰的峰面积差别就比较大，这个可能是什么原因呢？之前试过配溶液的时候加酸，这个化合物就不出峰了。

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