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主题：【已应助】氨基酸浓度测定

浏览0 回复9 电梯直达
Ins_7f8b4a9e
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发表于：2024/01/25 09:54:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大佬，我做氨基酸浓度测定，用的是异硫氰酸苯酯法，样品是以0.01mM的谷氨酸溶液为母液，梯度稀释25,50，100, 200， 400，然后取400微升标液，分别加入200微升的100mM异硫氰酸苯酯和1M三乙胺，室温放置衍生1小时，然后加入800ul的正己烷，震荡十分钟静置分层，然后取下清液过0.45μm的针式滤器进行检测，但是超出了紫外分光光度的测定上限，进行的是全扫描
推荐答案：有水有渝回复于2024/01/25
直接用紫外分光光度检测好像不是标准方法吧，过量的衍生剂可能有干扰
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通标小菜鸟
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2024/1/25 10:34:32 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主进样量是多大？如果超过检测器测定上限，拿建议减少进样体积或者加大稀释倍数，将曲线浓度配制的再低一点。
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2024/1/25 11:32:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:
楼主进样量是多大？如果超过检测器测定上限，拿建议减少进样体积或者加大稀释倍数，将曲线浓度配制的再低一点。
我先用紫外分光光度计测的
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通标小菜鸟
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2024/1/25 11:38:52 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_7f8b4a9e(Ins_7f8b4a9e) 发表: 我先用紫外分光光度计测的
紫外分光光度计测，那应该是浓度配置的太高了，样品颜色是什么样的？
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有水有渝
xky0230699
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2024/1/25 13:53:04 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
直接用紫外分光光度检测好像不是标准方法吧，过量的衍生剂可能有干扰
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ztyzb
zxz19900120
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2024/1/25 14:18:53 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主降低浓度试试，如果还不成线性就得用液相色谱了
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2024/1/25 14:44:12 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:
紫外分光光度计测，那应该是浓度配置的太高了，样品颜色是什么样的？
无色，您说的是衍生剂配的太高还是氨基酸的浓度
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Ins_7f8b4a9e
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2024/1/25 14:45:52 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
直接用紫外分光光度检测好像不是标准方法吧，过量的衍生剂可能有干扰
对，我们没有测氨基酸的液相色谱柱，确实发现衍生剂有干扰了，异硫氰酸苯脂和三乙胺用紫外都能扫出来峰
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2024/1/29 11:09:31 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
傲骨铮铮誓言都
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Ins_9c9e5508
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2024/1/29 11:59:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
棒。。。。。。。
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