主题：【分享】PCR实验室标准化建设，您不知道的那些事！

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发表于：2024/02/01 21:41:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

基因扩增实验又称PCR实验，其特点是能将微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物学研究和实验的常规方法，广泛应用于生物学各个领域，例如：艾滋病检测、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断，DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证，动、植物检疫，动物及其衍生产品检测，动物饲料、化妆品、食品卫生检测，转基因作物与转基因微生物检测等。

PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。

为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

1.在物理空间上，必须是完全相互独立的，各区域无论是在空闲还是在使用中，应始终处于完全的分隔状态。

2.不能有空气的直接相通。

理想的PCR实验室设计A

四个区域空调通风室内设计参数总结

使用实时荧光PCR仪依据

卫生部办公厅关于印发《医疗机构临床基因扩增管理办法》的通知；医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则；卫办医政发〔2010〕194号。

合并：扩增区、扩增产物分析区可合并。

PCR实验室需要的仪器设备

试剂准备区：冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等。

标本制备区：生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等。

扩增区：核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯、配备UPS电源。

分析区：酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。

PCR污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。要避免污染，首先应是预防，而不是排除。

PCR实验室装修

1.实验室墙壁、顶板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得在实验室内铺设地毯和悬挂窗帘。实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好、所有阴角采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；墙体和吊顶建议使用彩钢板。

2.地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

3.灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。实验室应设应急照明装置，同时考虑合适的安装位置，以保证人员安全离开实验室。

4.有可靠的电力供应和应急照明。每个房间必须装有紫外线杀菌灯，杀菌灯的安装高度在1.8～2.1m之间。

5.传递窗内部安装有紫外灯，供消毒用。

6.应配备足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。

7.实验室台（桌）柜和座椅等应稳固和坚固，边角应圆滑。实验台面应防水，并能耐受热、有机溶剂、酸碱、消毒剂及其他化学剂，一般采用环氧树脂台面。

8.实验台中的橱柜和实验台应牢固，实验台、柜和其他设备之间应保持一定距离，以便清洁。

9.实验室门为净化门，应有可视窗并带自动闭门器，实验室的门与门不能相对开启，必须错位开启。并达到适当的防火等级，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。

10.实验室应设洗手池，水龙头开关宜为非手动式，宜设置在靠近出口处。

11.给水管道应设置倒流防止器或其他有效的防止回流的装置；给排水系统应不渗漏，下水应有防回流设计。

12.应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。

13.应配备适用的通讯设备。

PCR实验室建设相关文件

1.《医疗机构管理条例》。

2.《医疗机构临床实验室管理办法》。

3.《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》。

4.《医疗机构临床基因扩增实验室管理办法》。

来源自：实验室整体建设微信平台