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实验室仪器耗材使用注意事项


1、液相色谱柱
关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。
高效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。

关于液相色谱柱的使用注意事项，一般有以下6个要点：
1.加装保护柱
保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。

保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(50～100次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。

2.过滤流动相和样品
流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。

当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48 h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。

所配制的样品试液在注入流路系统前均要经0. 45μm ( 0. 22μm则更好)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。

装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。

3.净化样品
当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分,如产生永久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。

4.避免过高柱压
虽然高效液相色谱柱能耐受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ,但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是
(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
(2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。
(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。
5.注意温度和酸碱度
一般以硅胶为基质的色谱柱最高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。

温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解,从而使填料性质改变,柱床塌陷,降低柱效,改变峰形。

目前的键合硅胶色谱柱标示的pH适用范围可达2～10,但在实际使用时应避免极端的pH条件,特别是在偏碱性的条件(pH≥8)下使用 ,如必须要在极端的pH条件下使用时,可通过以下方法避免柱损害:
(1)在泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相
(2)降低使用温度
(3)检验完毕后立即用与所使用的流动相互相混溶的“温和溶剂”彻底清洗。

6.正确及时的冲洗
开始试验前,应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱,如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶,如不能混溶,要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。

2、气相色谱柱
为了避免柱后被冲开和柱内担体塌陷,通气时缓慢升至所需柱前压。为避免检测器被污染,老化时请不要将色谱柱和检测器相连。当柱箱温度高于室温时, 载气中少量氧会损坏色谱柱内的固定相, 载气必须采用脱氧管进一步脱氧(建议所用载气中氧气含量不要超过1ppm) 。

安装色谱柱时, 产品牌号应面向操作者, 左侧为色谱柱的进样口。拆卸色谱柱时, 应先将柱温降至室温, 然后再关载气 。

使用毛细管色谱柱时的注意事项
毛细管色谱柱在气相色谱仪分析中是一个核心部分,正确使用毛细管色谱柱对气相色谱仪分析结果的准确性和延长毛细管色谱柱的使用寿命至关重要:载气必须采用脱氧管进行进一步脱氧 (建议所用载气中氧气含量不要超过PPM) ;拆卸色谱柱时先要将柱温降至室温,然后再关载气;

安装完色谱柱后, 要先通载气将柱内的空气置换干净后再升柱温;仪器载气管路使用金属管,使用前一定要进行检漏;请在不做分析时将柱温降到100度以下,可延长色谱柱使用寿命;

3、SPE固相萃取小柱
SPE固相萃取柱适合不同体积样品处理，SPE小柱也可根据客户的需求加工定制。自产的SPE小柱回收率高、流速适中、吸附量大、重现性好、性价比高、比国内同类产品有更高的重复性和一致性。在环境水体污染物的萃取、生命科学、食品农残和兽残以及动植物提取等方面可以达到的效果。

SPE固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。对于以硅胶为基质的固相萃取柱，其容量一般在1~5 mg/100 mg，也就是柱容量是填料质量的1%~5%。而键合硅胶离子交换吸附剂填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量为X毫克当量。这类填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。

SPE固相萃取柱为样品分析前的储备提供快速和有效的纯化和浓缩，为使这些产品获得zui佳的分析结果需要注意以下四个方面：
1、样品的物理和化学特征：影响因素如被分析物相对与介质的极性，带电荷的官能团，溶解性，分子量，等等，决定了被分析物与填充床的结合强度。

2、选择适当的保留方法：可能的方法有两种：*，被分析物不保留与填充床，而干扰物保留，如此纯化了样品。第二，被分析物保留与填充床，而干扰物不保留，或者在样品洗脱前先从填充床上洗脱。当样品需要浓缩时，常用的方法为第二种方法。

3、选择适当的填充料和填充床大小：不同的填料类型提供不同的选择性。填料类型应zui大的利用被分析物和样品中的干扰物的结构差异。选择有适当选择性的填料能获得zui高的回收率和zui高纯度的样品和提取物。当填充床的大小未经优化时，通常有回收率低的问题。填充床太大时会导致洗脱不完全，而填充床太小时会导致保留不完全，两种情况都是回收率比预期的低。

4、选择合适的调节，冲洗和洗脱溶剂：必须注意各类溶剂相对于填料的洗脱强度上样的样品调节溶剂应是没有洗脱作用的“弱溶剂”，必须使用缓冲也来控制潜在的带电荷化合物的离子化程度。冲洗溶剂应将弱保留的干扰物洗脱，但是洗脱强度不应太强而导致被分析物洗脱。洗脱溶剂的强度应足够使被分析物在较小的体积下（1-2ml）完全洗脱。

化合物在溶剂中的溶解性是一个重要的参数。一种溶剂如果不溶解被分析物而溶解样品中的干扰物，那么它是一种的冲洗溶剂，但是不能作为洗脱溶剂。

SPE固相萃取柱产品用途：用于样品的预处理，通过样品的分离，纯化和浓缩，提高样品进行的液化、气象分析的速度，去除杂志，延长色谱设备的使用寿命，避免色谱系统的污染。

4液体自动进样器样品瓶
4、1、样品瓶盖要盖紧，如果太松的话，进样针穿不透样品瓶的瓶垫而把其插入瓶内，会导致取样失败；

4、2、样品瓶不要装得过满，一般来说瓶内液面应保持在瓶内三分之二高度以下。如果液面过高，进样体积又比较大时，密封的样品瓶内易产生负压，影响进样针准确的抽取液体，甚至在针内产生气泡，从而导致进样重复性不好；

4、3、样品宝贵或样品量有限时，可使用样品瓶内插管或高回收率样品瓶，也可调节取样时样品针尖的位置，以大限度的利用有限的样品；

4、4、针尖的位置下到离瓶底只有0.5mm时，要注意使用规格标准的样品瓶，避免针尖戳到瓶底，损坏进样针；

4、5、选用规格标准的样品瓶，避免取样出错或失败，甚至损伤进样针。

5、针头过滤器
5、1、新的针头过滤器必须用清洁剂清洗干净洗净后用高温蒸汽杀菌、消毒、洗净的滤器要放好，避免污染。
5、2、针头过滤器使用前必须检查配件和密封圈是否齐全，有无损坏，然后按要求把它装好。
5、3、筒体的压力表是液体压力显示表，如果是二级过滤，针头过滤器压力表指数稍少一些是正常现象，使用时间越长，他们的压力会增大，流速减少，这说明滤芯空隙大多已被堵塞，要冲洗或者更换新的过滤芯。
5、4、针头过滤器的安装时进出口不要接反，管道滤器底板边上的口是液体进口处，管道接在滤芯插口的管子是干净液体出口处。
5、5、滤芯插入口时，滤芯一定要垂直，插入口后压板扣住翅片，扭紧螺丝不动即可。226接口的滤芯入口后，应旋转90度卡紧，这是安装中的关键，如果有一点不小心，就会达不到密封，容易漏水，就达不到你的使用要求。
5、6、新的滤芯是生产厂家在洁净的生产厂房内用塑料袋封装的未使用切勿撕破塑料包装，使用要求较高的滤芯，安装好后要经过高温蒸汽杀菌消毒。
5、7、需要过滤的液体进入时，应打开针头过滤器上面的放气开关，让液体充满柱体，否则过滤效果不好。