我们在准备反相液相色谱的流动相时,甲醇和乙腈被广泛用作有机溶剂。但是为什么有时候使用甲醇,而有时候使用乙腈呢?
乙腈是一种极性的不可电离非质子酸,由于存在由于存在C≡N,它可以带来π-π相互作用,又因为氮原子具有高电负性,它也可以与另一分子形成氢键。甲醇是一种极性的可电离质子酸,它可以和另一个分子相互作用形成氢键。为什么甲醇也可以形成氢键呢?因为甲醇上有-OH的存在,氧是高电负性原子,它可以部分极化分子。它在氧上产生微负电荷,在氢原子上产生微正电荷。因此,这个微正电荷的氢原子可以与微负电荷的原子形成氢键。对于分离酸碱或电负性强的化合物有提高选择性。那么什么是极性可电离质子溶剂?极性可电离质子溶剂指的是具有氢原子与氧(如羟基)、氮(如胺基)或氟(如氟化氢)结合的溶剂。乙腈中存在氢原子,但这些氢原子不与氧形成氢键,因此,不能说乙腈是可电离的极性溶剂。而甲醇,氢原子可以与氧形成氢键,因此,甲醇是可电离极性溶剂。
当使用这些有机溶剂配制流动相,选择检测波长时,了解它们的紫外截止波长是非常重要的。乙腈与甲醇相比,它的截止波长更低,约为190nm,而甲醇约为210nm,这意味着使用乙腈时可以在190nm的低波长下进行检测,但使用甲醇作为有机溶剂,可能无法使用低于210nm的波长,因为此时会产生很多基线噪音。
另一个重要因素是甲醇和乙腈的经济成本。乙腈价格高于甲醇,因此当有可能使用甲醇代替乙腈时,可以使用甲醇以节省实验室成本。