主题:求助:930A 荧光分光光度计的滤光片的选择

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coffeegirl
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    请问930A 型荧光分光光度计怎么确定滤光片的波长?如激发波长376nm,发射光波长520nm,怎样确定滤光片的组合?希望各位不吝赐教,谢谢:)
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prime
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激发选紫色滤光片(330型)
发射选(470型+500型组合)
likejing
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上面的童鞋,我想问下如果我需要激发波长是436,发射波长是486,我应该怎么选择呢?这个复合有什么规律吗?我用的也是930A,急求您的帮助。
sunny04141125
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激发端滤光片用于把光源的光分出你需要波长的光,发射端用于滤除瑞利峰及二级谱等杂散光。
例如:我需要用365nm波长的激发光来激发荧光样品,需要选择激发滤光片365nm或包含365nm的激发带通型滤光片(带通型滤光片作用就是滤出相应波长的光,不同带通型滤光片,它的带通量不一样,根据实际情况选择合适的激发滤光片)。

激发365nm,在发射谱图中365nm处会出现激发光引起的瑞利峰(这个峰的能量相当高),在730nm(即二级谱,倍频)处会出现瑞利峰的二级谱,这些峰都属于杂散光,在进行发射谱图测定的时候是多余的。因此可以选择合适的发射端滤光片来滤除它们。发射端滤光片属于截止滤光片(一般是前截止),如激发365nm,可以选择大于其激发波长的滤光片如390nm(滤除小于390nm波长的信号),这样既可以得到漂亮的谱图。

注意:在选择发射滤光片的时候一定要注意如果激发365nm,样品的荧光峰在420nm,发射滤光片就必需选择小于420nm,否则会把荧光信号也滤除掉!
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