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主题：【求助】F-7000测量荧光量子效率的问题

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ravel

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发表于：2011/05/09 22:49:49 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不知道怎么做固体的荧光量子效率。照说明书做了一下，量子产率不是0就是负数。

校正的部分先不管了。测量的部分 method部分不知道选 emission还是exctitation，激发波长啊，范围啊，也不知道有什么讲究。

重点是这么设定后，出来的光谱除了激发光有一个峰，其他荧光峰一个也没有，也不知道是哪里出了问题。只好来求教大家了。

坛子里搜了搜，资料有一些，基本上手头都有了，只不过是英文的。

测荧光量子效率的时候要先测一个标准物质，然后再测一个试样，之后导入数据进行计算。我的问题是用发射光谱还是激发光谱来做测试有什么区别吗？有做过的人能详细写一下步骤就好了。感谢。

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2011/5/12 15:35:50 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

F-7000没驶过。
不过固体量子效率和液体不同，差别挺大的，尤其是反射峰那块。

至于校正吧，大多数只能差不多就那样，高精度测量目前在现成仪器上是不可能实现的。

我搞过几年固体荧光量子效率的测试分析，国际上大多数测试方法从原理上讲本来就存在很多简化，这种简化在某些波段会引起很大的误差（结果就是测量出来的量子效率为负或者超过1）。

最简单的方法，找个荧光激发发射峰和你样品类似的，做参比，利用它的量子效率来反推你的量子效率。

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2011/5/13 10:28:17 Last edit by ppddppdd

ravel

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2011/5/12 17:49:13 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ppddppdd(ppddppdd) 发表:
F-7000没驶过。
不过固体量子效率和液体不同，差别挺大的，尤其是反射峰那块。

至于校正吧，大多数只能差不多就那样，高精度测量目前在现成仪器上是不可能实现的。

我搞过几年固体荧光量子效率的测试分析，国际上大多数测试方法从原理上讲本来就存在很多简化，这种简化在某些波段会引起很大的误差（结果就是测量出来的量子效率为负）。

最简单的方法，找个荧光激发发射峰和你样品类似的，做参比，利用它的量子效率来反推你的量子效率。

谢谢您的解答。貌似就是对我的某些物质内量子效率为负数，外量子效率还是正的。不知道这种结果有没有参考价值
当外量子效率超过0.3的时候，内量子效率就大于1甚至是负的。不明白测量误差为什么会导致测的吸收值为负数。

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ravel

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2011/5/12 23:30:51 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

刚刚收到工程师的回复，散射光范围设错了。明天重新计算一下应该就可以了。感谢1楼的热情帮助。

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fragr

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2011/5/14 13:22:21 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

粉末材料的量子产率测量（积分球辅助）一般都是采用发射谱来测定激发峰（散射峰），和荧光峰；条件相同或者具有比例计算可能；设定发射波长范围包括从激发波长-10nm到发射波长完毕。

基础校正很重要。

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2011/5/14 20:38:25 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 fragr(fragr) 发表:
粉末材料的量子产率测量（积分球辅助）一般都是采用发射谱来测定激发峰（散射峰），和荧光峰；条件相同或者具有比例计算可能；设定发射波长范围包括从激发波长-10nm到发射波长完毕。

基础校正很重要。

照工程师的做了，结果全部接近0，还是不对啊。不知道您所说的基础校正是什么？散射校正，无样本校正和有样本校正？之前工程师来过，校正后留下一些校正文件，不知道可否直接使用？

我的东西发射光谱从550开始到700结束

用激发波长480nm，范围470-700nm，您看可以么？

因为是做膜的材料，首先测了一块标准物质的光谱，然后换白板夹我的试样测一个样品的光谱。最后导入这些数据，设定散射光范围和荧光峰范围。
工程师说散射光范围在激发波长的正负10nm。

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fragr

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2011/5/16 13:15:28 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

所谓测发光效率，首先需要发光光谱。

需要先期测量是否发光？正常测定条件下，能够观测到足够信号强度？如果没有，当然发光效率是可能为0.

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ravel

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2011/5/16 13:41:59 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 fragr(fragr) 发表:
所谓测发光效率，首先需要发光光谱。

需要先期测量是否发光？正常测定条件下，能够观测到足够信号强度？如果没有，当然发光效率是可能为0.

我的东西一定发光，而且很强。以至可见光照射下能显出鲜艳的红色，荧光量子效率应该在0.1以上。在那个条件下，普通的发射光谱能做出来，而且比较明显。不过保持同样的条件，换了积分球，峰就不明显了。因为激发光附近的那个峰很高。有必要调狭缝宽度？

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fragr

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2011/5/17 10:46:14 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

测定过程一定有问题。可以先做发射光谱扫描。

看来操作说明书你一定要细细阅读了。

可以在积分球状态下，做光谱扫描看看。

该帖子作者被版主 pfz1985加 2积分， 2经验，加分理由：深入讨论

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ravel

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2011/5/17 23:00:20 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 fragr(fragr) 发表:
测定过程一定有问题。可以先做发射光谱扫描。

看来操作说明书你一定要细细阅读了。

可以在积分球状态下，做光谱扫描看看。

您是说，在安装积分球条件下直接装样品做发射光谱？怎么说呢，现有条件，发光峰的高度是40。如果用480nm激发，在480会有一个很高的基频峰出现，大概是4000，可能是因为这个导致测量不准？

说明说很烦人，有罗丹明，氧化铝，白板（可能是硫酸钡？，纯白的白片），标准参比物质（白色的片后面加了个盖子的那种），罗丹明是测溶液量子效率的可以不管。后三样东西弄晕了。

照操作书上是这样的，先把氧化铝装矩形盒测无样品校正，然后加标准参比物质测有样品校正
然后氧化铝装矩形盒测无样品光谱，然后测戴测物质光谱。

上述为粉末物质效率的测量，但我的东西是一张膜，说明书上没有的。

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jixf_1114

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2011/5/19 17:38:29 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

测定固体量子效率前，对于仪器有个性能验证及光谱校正的要求，包括：激发、发射波长的准确性，信噪比。激发光谱、发射光谱的校正。及长波长的校正，关于这些可以参照说明书。
之后在用积分球的情况下测定发射谱，确定最佳激发波长与发射谱范围。然后优化条件，调节狭缝与电压，使得激发光的散射光强度没有超出仪器检测限，而且发射光谱不能太弱了，并选择不同的扫描速度，比较重复光谱，确定最佳扫描速度。
再然后，才是用氧化铝测定激发光的强度，然后是激发光散射强度与发射光谱。再然后是间接激发的情况，然后是根据公式去计算得到绝对的量子效率。

步骤比较多，也很繁复。

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