主题:【求助】色谱柱换了 梯度洗脱液是否需要换 有必要吗

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guojiang
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梯度洗脱液A :9%乙腈2%乙酸20ug/ml EDTA混合水溶液;B液:80%乙腈 2%乙酸20ug/ml EDTA混合水溶液。 Phenomenex Luna 5 μm Phenyl-Hexyl column of dimensions 250 mm ¥ 4,6 mm, fitted with a Phenomenex SecurityGuard2) 4 mm ¥ 3,0 mm Phenyl-Hexyl cartridge. 苯乙基柱如果换成C18(ODS)柱 silica Zorbax Rx-C18 column with 4.6mm×250mm (i.d.×length) and 5μm nominal particle size。 梯度洗脱液是否有必要换?
推荐答案:Easy-Boy回复于2007/08/27
要看对你分析的物质分离度有没有影响,有影响还是要调整的,没影响就不要换了。
补充答案:

mailson回复于2007/08/27

我觉得是需要换的,因为两种柱子是很不同的,看过资料,如果不换的话好象会降低柱效

深海的海豚回复于2007/08/27


如果需要真实还原一个方法,建议采用原方法的色谱柱和相应条件,至少要尝试一次,如果没有做过就改变的话,很有可能会出问题。
我比较过苯基柱子和ODS(C18)做相同样品的区别,差别还是很大的,所以,最后还是用苯基柱子了。
当然,不同物质,可能情况各有不同,但是,建议先做做看,再下结论,节约和方便是我们都想要的,但是,前提是准确可靠。

lenovο回复于2007/08/30

你可以先不换做一下。一般色谱柱对流动相是有影响,但要看两种色谱柱差多少,有些差别很小就可以不用换啦。

case06回复于2007/08/30

不用,没必要,

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深海的海豚
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原文由 guojiang 发表:
梯度洗脱液A :9%乙腈2%乙酸20ug/ml EDTA混合水溶液;B液:80%乙腈 2%乙酸20ug/ml EDTA混合水溶液。 Phenomenex Luna 5 μm Phenyl-Hexyl column of dimensions 250 mm ¥ 4,6 mm, fitted with a Phenomenex SecurityGuard2) 4 mm ¥ 3,0 mm Phenyl-Hexyl cartridge. 苯乙基柱如果换成C18(ODS)柱 silica Zorbax Rx-C18 column with 4.6mm×250mm (i.d.×length) and 5μm nominal particle size。 梯度洗脱液是否有必要换?

能不能换,应该还是以试验结果为准,没有证实的东西,判定总不好下的。

个人认为,这两种柱子应该是差距很大的,
肯定会影响你被分析组分的出峰大小甚至出峰顺序。
其实,许多条件都已经发生了变化,
顺便问一下楼主:
为什么考虑换柱子?自行改变?或者有什么依据?目的何在?
guojiang
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我们实验室的高效液相色谱柱没有 苯乙基柱  倒是有C18(ODS)柱,我参考的国际标准分离法中说可以使用 苯乙基柱 具体请根据自己的条件
我想 同为反相—HPLC  又非强制要求,可否换用C18(ODS)柱呢,可以的话 就方便做试验了
Easy-Boy
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要看对你分析的物质分离度有没有影响,有影响还是要调整的,没影响就不要换了。
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我觉得是需要换的,因为两种柱子是很不同的,看过资料,如果不换的话好象会降低柱效
深海的海豚
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原文由 guojiang 发表:
我们实验室的高效液相色谱柱没有 苯乙基柱  倒是有C18(ODS)柱,我参考的国际标准分离法中说可以使用 苯乙基柱 具体请根据自己的条件
我想 同为反相—HPLC  又非强制要求,可否换用C18(ODS)柱呢,可以的话 就方便做试验了

如果需要真实还原一个方法,建议采用原方法的色谱柱和相应条件,至少要尝试一次,如果没有做过就改变的话,很有可能会出问题。
我比较过苯基柱子和ODS(C18)做相同样品的区别,差别还是很大的,所以,最后还是用苯基柱子了。
当然,不同物质,可能情况各有不同,但是,建议先做做看,再下结论,节约和方便是我们都想要的,但是,前提是准确可靠。
lenovο
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你可以先不换做一下。一般色谱柱对流动相是有影响,但要看两种色谱柱差多少,有些差别很小就可以不用换啦。
case06
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