主题：【求助】急求： 用荧光探针Fura-2/AM 测细胞内钙离子浓度，可以用单波长的荧光分光光度计么？

原文由 whl5218 发表:
紧急求助，感激万分：

用荧光探针Fura-2/AM 测细胞内钙离子浓度，可以用单波长的荧光分光光度计么？
查资料，上面多用 双波长荧光分光光度计，一般是（岛津日本RF_5000型双波长紫外荧光分光光度计） ，
我测得是细胞内的钙离子浓度，用的探针是 Fura-2/AM , 激发峰波长：340nm和380nm。我们实验室只有  美国瓦里安的Cary Eclipse型号的荧光分光光度计，而且没有340nm与380nm的滤光片， 请问可以测么？

请大家指教！  QQ ：174690800
E-mail :  whl5218@163.com
13775536885

原文由 whl5218 发表:

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用荧光探针Fura-2/AM 测细胞内钙离子浓度，可以用单波长的荧光分光光度计么？
查资料，上面多用 双波长荧光分光光度计，一般是（岛津日本RF_5000型双波长紫外荧光分光光度计） ，
我测得是细胞内的钙离子浓度，用的探针是 Fura-2/AM , 激发峰波长：340nm和380nm。我们实验室只有  美国瓦里安的Cary Eclipse型号的荧光分光光度计，而且没有340nm与380nm的滤光片， 请问可以测么？

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原文由 toallen(toallen) 发表:
fro-3现在做细胞内钙离子的比较的多，我这边有日立F-4600怎么做的

原文由 wade(wry413) 发表:
采用fura-2探针测量钙离子浓度时，必须要求光源波长具备340/380快速切换的功能，且要求专业的测量处理软件。日立分光光度计做着玩玩可以，原则上不能做为实验数据的。能做这方面测量仪器比较混杂，大多数不专业，基本上都是山寨机。国内目前用户较多的是采用滤镜轮系统，即楼上说的采用不停旋转的滤光片来切换波长，340/380机械切换最快40ms/次，激发波长带宽有滤色片决定，不能改变，且光强被减弱，做出数据相对准确但与目前国际上专业测量钙离子浓度测量还是有差距的。在全球范围内，做钙离子测量的厂家最专业的要数美国PTi 了，该厂家DeltRam 光源波长切换速度为，<2ms,检测器不但可以采用传统的CCD,对细胞内钙流变化非常快的样品可以采用PMT检测器，，，共同交流