主题：【求助】（已应助）高分子物质检测分析方法

原文由 cbjcn1985 发表:
聚乙二醇 (PEG)残留量检定法
试剂
1. 0.1mol/L碘溶液：取2.0g碘化钾，加少量水溶解，再加1.3g碘溶解，加水定容至50ml。
2. 0.5mol/L高氯酸溶液：取3.5ml高氯酸，加水稀释至50ml，即得。
3. 氯化钡溶液 取氯化钡的细粉5g，加水使溶解成100ml，即得溶液标准。

聚乙二醇溶液的制备
    精密称取聚乙二醇（分子量4000或6000）0.100g，置100ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。试验前，精密量取贮备液1ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得标准聚乙二醇溶液（每1ml相当于100μg的聚乙二醇）。

供试品溶液的制备
将供试品用水稀释至蛋白质浓度不高于1%。

测定法
    取大小相同的试管10支，按顺序加入标准聚乙二醇溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml；每管加入浓度应不高于1%的蛋白质溶液0.2ml，每管依次加入水1.6、1.4、1.2、1.0、0.8ml制备成10～50μg/ml的标准聚乙二醇溶液，分取不同稀释度的标准聚乙二醇溶液、供试品各1.0ml，每个稀释度做双份，加入高氯酸溶液（0.5mol/L）5.0ml，混匀，室温放置15分钟，3000r/min离心10分钟(离心后上清液如显混浊则要过滤至澄清)。取4ml上清液加入氯化钡溶液1.0ml和0.5ml碘溶液，混匀，室温反应15分钟，照分光光度法（中国药典 2005年版 三部 附录II A），在535nm波长处测定吸光度；同时以1ml水代替标准溶液，按上述方法自“加入高氯酸溶液（0.5mol/L）5.0ml”起同样操作，作为空白。

结果计算
以不同稀释度的标准聚乙二醇溶液的浓度和对应的吸光度作直线回归，得直线回归方程。
将供试品溶液的吸光度代入直线回归方程，计算出供试品溶液中聚乙二醇含量F(μg/ml)，按下式计算：
供试品中残留聚乙二醇浓度%（g/ml）＝F ×G×H /I×104
F为供试品溶液中聚乙二醇含量，μg/m；
G为待检供试品稀释倍数；
H为供试品的实际体积，ml；
I为供试品的标示体积，ml。

[附注]：
1.整个比色过程应在试剂加入以后的15～45分钟内完成，否则将要影响结果。
2.本方法的灵敏度随被测定聚乙二醇的分子量的增加而提高。