紫外可见分光光度计(UV)

主题:【每周一问】如何使用比色皿?

浏览0 回复47 电梯直达
丑石
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大家好!最近常用紫外分光光度计进行试验,可是我就是不明白不同型号的比色皿有什么区别,还有如何使用好它们我都很迷茫?
是不是比色皿越大精确度就越高啊?还是根据所测量物质的稳定性或者均一性来选择比色皿的啊?

斑竹zhouyuhu回答如下:1 关于比色皿大小的选择:不是越大越好,要综合考虑.
  首先是仪器问题,你的仪器的比色皿架子只能用1厘米的,那你考虑别的尺寸也没有意义.如果条件允许,那咱继续往下.按照郎伯-比尔定律A=abc,比色皿尺寸和吸光度成正比,如果你的样液吸光度很小,那你考虑用大点的比色皿,比如你用1厘米的比色皿测定值为0.1,那你用2厘米的就为0.2,正好在大家常说的0.2-0.8之间了.同样的,如你用1厘米的比色皿测定值为1.0,那你用0.5厘米的就为0.5,正好在大家长说的0.2-0.8之间了.
  其次考虑你样液的数量,如果你前处理完毕后,样液只有1毫升,那你就不可能选用1厘米的比色皿,因为1厘米的装80%要3.24毫升.所以你要选择更小一些的.现在新出的好多微量的比色皿也不错的. 
  再次就是板油上面说的,考虑到灵敏度的问题,一般摩尔吸收系数在10000以下属于低灵敏度,在10000-60000之间叔叔中等灵敏度,在60000以上属于高灵敏度.在这里给大家一个参考,摩尔吸收系数在100000时,用1厘米的比色皿,浓度在2.0*10^-6到 8*10^-5时,可以得到0.2-0.8之间的吸光度,大家可以把握以下.
  2 不同型号的比色皿有什么区别???
  一般在使用的时候要进行配对,因为不同的比色皿在工艺制造过程中空皿吸光度不同,会造成误差,如果你用一个,那就不用了.
  配对方法:石英的在220纳米装水,在350纳米装0.001mol.L-1重铬酸钾的高氯酸溶液.玻璃的在600纳米装水,在400纳米装0.001mol.L-1重铬酸钾的高氯酸溶.以一个比色皿为参比,调节透射率为100%,测量其他各比色皿的透射比,偏差小于0.5%的比色皿可以配对使用.
  如果可以扣除池空白的话,就不用配对了.
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根据摩尔吸光度和样品浓度来选择,灵敏度高 含量高用小的,灵敏度低含量低用大的.
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楼上说的很对了
其实你可以自己做个实验的
分别用不同厚度的比色皿检测同一种标准溶液
算算哪种方法较好
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将比色皿内用无水乙醇洗净,透光面(外侧)用境头纸擦拭干净,即可使用.
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原文由 jiangyunjun3 发表:
根据摩尔吸光度和样品浓度来选择,灵敏度高 含量高用小的,灵敏度低含量低用大的.

好象摩尔吸光度在0.2 ~ 0.8为好.
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zhuxiugao
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呵呵,俺们的比色皿一般选择光径在1mm的,只是根据光度的不同选择玻璃或石英的,
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