主题:【讨论】选用不同分子量的GPC标样(PS)可造成检测结果相差五六千?

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kairy
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我们一直用PS聚苯乙烯做GPC的窄标,可是最近的实验让我很疑惑:我同时(所用仪器条件都一样)进两组不同分子量的PS(为了方便理解,将其分别命名为A组A1、A2、A3、A4,B组B1、B2、B3、B4,而且A组和B组对应的分子量都很接近,也都分布在我们样品结果范围周围)和一个样品X,做完后分别用这两组标样去处理这个样品,发现处理结果竟然相差五六千(如用A组标样校正得到样品X的MW是97000,而用B组标样得到是92000,重复实验都是这样)!很是疑惑!那我应该相信哪个结果呢?
GPC是相对较正的结果,我觉得标样的这点差异不至于对结果有那么大的影响吧?而且阿我们每次购买标样都不可能是与上次分子量相同的,这样的数据不是没多大的可比性?

请求各位帮忙解惑啊!在下先感激了!
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kairy
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我觉得要理清这个问题,是不是得从校正曲线入手?我们用的是次3方程(WATERS软件),用标样的Mp和RT做曲线,然后计算样品的MW,我们还严格控制标样和样品的相应值一致。为什么标样分子量差异会对检验结果有这么大的影响,有没有比较懂理论或有这方面运用的XDJM,帮忙分析分析啊。还有MP和MW是怎么换算的?
tigertooth
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这很正常,GPC的结果很大程度上依赖于标样,对于9万多的分子量,两个标准曲线的结果差五、六千完全可以接受,差15%都是允许的。
标样的标定方法是不一样的,我也遇到过类似的情况,一个W的gpc随机标样,上面标称18万,可怎么做出峰都比我的20万PS标样早,我算出来是21万了。这是标样啊!
kairy
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viscotektegent
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原文由 kairy 发表:
來GPC數據的可信度真的不咋的啊


你可以根据你的样品的分子量的大致范围,来用一些与之相匹配的标样来作标准曲线。例如:象你这个样品只有9万、10万的,那么作标准曲线时,就别用太大的标样,而多用几个几万、十几万的,这样可能会好些。
传统的GPC,数据的影响因素很多,所以偏差大也是在所难免的。其实你做的还可以啦,很不错了。说明你的仪器也不错,系统状态也比较好,柱效还不错。等你的柱子柱效下降时,可能更不好呢。
制备液相
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我觉得你可以用已知分子量的标准物质来做未知样品,用你所做好的标准曲线,看看结果是否能和你的已知相符合。
这样,你的两条工作曲线都能有验证。
再就是GPC本身就有误差,一般在10%以内就可以认为正确。
kairy
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原文由 viscotektegent 发表:
原文由 kairy 发表:
來GPC數據的可信度真的不咋的啊


你可以根据你的样品的分子量的大致范围,来用一些与之相匹配的标样来作标准曲线。例如:象你这个样品只有9万、10万的,那么作标准曲线时,就别用太大的标样,而多用几个几万、十几万的,这样可能会好些。
传统的GPC,数据的影响因素很多,所以偏差大也是在所难免的。其实你做的还可以啦,很不错了。说明你的仪器也不错,系统状态也比较好,柱效还不错。等你的柱子柱效下降时,可能更不好呢。


因為樣品是寬分布,Pd在3左右,樣品是9萬,那它出峰起始段可能會落在几十萬分子量處,末尾可能在几千處。
kairy
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我們打算以后盡量選用相同分子量的PS來校正,以避免由于PS的不同導致結果的差異,謝謝各位熱心幫助!
nnsss
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误差是很大的,但是需要有一个标准就可以,就是大家承认即可,另外有可以测绝对分子量的仪器
polylactic
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lwlwb
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原文由 kairy 发表:
我們打算以后盡量選用相同分子量的PS來校正,以避免由于PS的不同導致結果的差異,謝謝各位熱心幫助!


你说的是峰尖分子量么?如果是峰尖分子量,跟你的柱子的分辨率有关系;如果是重均或数均,则跟你的检测器的灵敏度有关系,也就是你的峰起点和峰落点选择是否重现。

另外,90000多的分子量差5000,已经在10%之内,应该还是比较理想的。
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