PCR................................................................................................................................. 2
RT-PCR............................................................................................................................ 4
琼脂糖核酸电泳............................................................................................................... 6
胶回收纯化DNA.............................................................................................................. 6
大肠杆菌质粒DNA的提取(碱裂解法).......................................................................... 7
乙醇沉淀DNA.................................................................................................................. 8
酶 切............................................................................................................................. 8
连 接............................................................................................................................... 8
感受态细胞的制备............................................................................................................ 9
转 化............................................................................................................................. 10
重组子的筛选和鉴定...................................................................................................... 10
真核细胞的转染.............................................................................................................. 11
转染细胞的稳定筛选....................................................................................................... 11
重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量.......................................................................... 12
肿瘤细胞体外传代培养及保种........................................................................................ 13
肿瘤动物模型的建立...................................................................................................... 14
小鼠尾静脉注射方法...................................................................................................... 14
肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验........................................................................................ 14
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养................................................................................. 14
实验动物免疫方案.......................................................................................................... 15
血清制备........................................................................................................................ 16
ELISA............................................................................................................................ 16
血清学筛选克隆新抗原/新基因....................................................................................... 17
ELISPOT........................................................................................................................ 20
藻酸盐包裹实验............................................................................................................. 21
重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作................................................................... 21
(细菌内同源重组AdEasy System)............................................................................... 21
组织病理技术................................................................................................................. 26
免疫组化染色................................................................................................................. 27
流式细胞仪常用的几种检测方法..................................................................................... 29
Western Blot(免疫印迹法)................................................................................................ 34
PVDF膜上蛋白的可逆染色............................................................................................. 37
人肿瘤抗原的识别与鉴定............................................................................................... 39
-免疫沉淀实验流程...................................................................................................... 39
蛋白质组实验流程.......................................................................................................... 41
SDS-PAGE胶染色.......................................................................................................... 44
数据库搜索(Databases search)......................................................................................... 45
主要的公共数据库及网址............................................................................................... 46
蛋白质的序列分析流程................................................................................................... 48
聚丙烯酰胺凝胶的配制................................................................................................... 49
双向电泳常用溶液配方................................................................................................... 51
分子生物学常用溶液配制............................................................................................... 53
另外给大家推荐一个资料共享的地方http://www.yiqi120.com/zlzx.asp,好东西大家一同分享.
国内某重点实验室分子生物学实验方法与总结