主题：【转帖】气相色谱知识 学习色谱的必看的

1、正确选择毛细管柱

　　柱长度的选择

　　分辨率与柱长的平方根成正比。在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长。较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。

　　一般来说：

　　15m的短柱用于快速分离较简单的样品，也适于扫描分析;

　　30m的色谱柱是最常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上完成;

　　50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。

　　应该注意，柱长增加分析时间也增加。

　　柱内径的选择

　　柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。

　　0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。分离复杂样品较好。

　　0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色谱柱，但柱容量约高60%。

　　0.53mm：具有类似于填充柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流样，当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析)，选择大口径毛细管柱较为合适。

　　液膜厚度的选择

　　液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。厚度增加，保留也增加。

　　0.1～0.2m ：薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快，所需柱温度低，且高温下柱流失较小，适用高沸点的化合物的分析。

　　0.25～0.5m ：常用的液膜厚度。

　　厚液膜：对分析低沸点的化合物较为有利。

　　2、毛细管的安装

　　毛细管柱的安装常为人们所忽视，往往会出现作填充色谱柱多年的技术人员，刚使用毛细管柱时，做出的色谱图还不如填充柱的色谱图，这使人们很难理解。化工论坛但究其原多数是由于毛细管柱的安装和操作上的毛病，而不是柱子本身和仪器系统的问题。因此，一根好的毛细管柱和设计得很好的色谱系统，还必须使柱子在系统中安装得合理，才能做出好的结果。

　　2.1毛细管柱与进样器的连接

　　对于分流进样，毛细管柱的入口端一定要伸过分流进样器的分流出口，亦就是使毛细管柱的入口处于载气的高流速区域。如果毛细管柱的入口在分流进样器的分流出口以下，处于载气的低流速区域，得到的色谱图还不如填充柱，所以必须将毛细管的入口伸过分流进样器的分流出口，这样才会得到尖锐的峰形。

　　对于分流/不分流进样，毛细管的入口应接到进样器的底部，这样可以使汽化管中的样品完全进入柱子，也不会出现气流清洗不到的“死区”。

　　2.2毛细管柱与检测器的连接

　　在毛细管连接到检测器之前，先接通载气，看一下柱子的出口是否有载气通过，(将柱子出口浸入清水中看是否有气泡出现)如果没有载气从柱子出来，说明柱前的系统中有的地方漏气或柱子堵塞，应找出原因加以解决。然后将柱子的未端尽可能的伸到检测器(FID)的喷嘴以下的1~2厘米处(但不能超过喷嘴，并使柱子的出口处于气流的最高流速区域(即氢气引入口以上)，如果柱子不能直接伸到检测器的喷嘴下1~2厘米处，但必须伸到尾吹气入口的上部使柱子的未端处于气流的高速区域。

　　2.3分流比的测定与选择

　　分流比可以定义：样品完全汽化时与载气充分混合后，样品通过分流进样器进入柱子的流量FC与通过分流器的流量F分流之比：

　　分流比= FC/F分流　　 (式1)

　　有的人把分流比定义为：样品进入汽化室后，进样器中总的流速=FC十F 分流与柱流速FC之比：

　　分流比=FC/(FC +F分流)　　 (式2)

　　例如，柱子出口流 速为1ml/分，分流器放空的流速为99ml/分，则分流比为100:1 ，因为柱流速FC比分流流速小得多，所以(式1)、(式2)的结果很相近，FC和F 分流可通过皂沫流量计测量。如果载气通过毛细管柱的流量很小，用皂沫流量计不容易测量，FC也可以通过计算求出：

　　FC= 60uπr2

　　其中u为载气的平均线速度，单位厘米/秒。u可以通过进样后用某物质的保留时间求得，某物质可以用甲烷、甲醇等均可，要求是色谱柱对该物质的吸附要小，一般以甲烷为宜，具体计算方法为：

　　u=柱长(厘米)/保留时间(秒)

　　分流比及分流有大小靠分流阀进行调节，选择适当的分流比也很重要。如果分流比很小，样品大多数进入柱子、容易使峰变宽，形成前伸峰。分流比一般选择在 1:100~200之间，这时样品的起始组分的谱带扩展很小，出峰尖锐。对一根0.25mm内径的毛细管柱，用N2作载气，最佳流速0.3~0.4ml/ 分，则分流流量调到50ml/分左右即可。