主题:【求助】做毛细管电泳电化学发光的

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lhj666
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用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱,为什么老是分不开呢?用得磷酸盐缓冲,PH6-10的都用了,硼酸缓冲也试了,就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大,而氧化苦参碱则很小,两者配比优化了也不怎么能分开,基本上重叠在一块,而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的,为什么我老是分不开呢,也没找出原因,郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈!
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i_am_ling
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楼主优化了很多条件,都优化了那些条件?pH进过优化确定的,还是参考文献的?
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原文由 i_am_ling(i_am_ling) 发表:
楼主优化了很多条件,都优化了那些条件?pH进过优化确定的,还是参考文献的?

优化了运行缓冲液的的浓度(10,15,20,50mmol/L),pH值(6-10),先试的参考文献上的不理想,然后又自已优化的也不大好。
sunpengwjh
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楼主优化了很多条件,都优化了那些条件?pH进过优化确定的,还是参考文献的?

优化了运行缓冲液的的浓度(10,15,20,50mmol/L),pH值(6-10),先试的参考文献上的不理想,然后又自已优化的也不大好。

不太理想就是有分开的迹象了?只优化了缓冲溶液浓度和pH对分离的影响么?其他的条件没有进行有化么?楼主能否经自己分离最好的谱图上传一下,看看谱图!
spying
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用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱,为什么老是分不开呢?用得磷酸盐缓冲,PH6-10的都用了,硼酸缓冲也试了,就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大,而氧化苦参碱则很小,两者配比优化了也不怎么能分开,基本上重叠在一块,而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的,为什么我老是分不开呢,也没找出原因,郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈!

一个很大一个很小,差很多么?你确定那个小的也是物质的峰么?还是那个大的峰时这两个组分的,只不过没有分开?
i_am_ling
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用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱,为什么老是分不开呢?用得磷酸盐缓冲,PH6-10的都用了,硼酸缓冲也试了,就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大,而氧化苦参碱则很小,两者配比优化了也不怎么能分开,基本上重叠在一块,而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的,为什么我老是分不开呢,也没找出原因,郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈!

楼主的进展怎么样了?问题解决了么?
plf0717
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我也是做CE-ECL的,

样品分不开必须从电泳方面找原因;分离电压、电泳PH、电泳缓冲液添加剂的选择等等。

发光信号不强得从柱后考虑了;检测电位、柱后缓冲液PH、电极的处理以及电极与毛细管之间的间距等等。

祝你成功!
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