主题:【求助】问个小白问题:用凝胶层析只做分离不做测定,也需要专门的色谱柱吗?

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猫绒绒
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我要测土壤中的抗生素含量,目前计划流程是这样的:提取——HLB固相萃取——凝胶层析——LC/MS/MS检测
因为腐植酸会对色谱影响很大,所以有人建议我用分子排阻滤掉大分子,但是我能查到的资料都是用凝胶色谱测定大分子的,想知道如果我只是要层析分离不用测定,是不是也要用专门的凝胶色谱柱?还是买了填料自己做个层析柱就可以?自己做的话怎么控制洗脱时间?
从来没接触过凝胶,还请大大们指点!
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tigertooth
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自己买填料装柱子是可以的,你可以加一个检测器来检测物质的洗脱,如果有自动馏分收集就更好了。如果你要控制洗脱时间只能用现有的HPLC做一个GPC纯化系统了,HPLC的泵稳定,你就可以控制洗脱时间。
猫绒绒
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呃……事实上我是不知道手动的话怎么判定大分子已经被洗出去了,没有经验的情况下一定要加检测器才可以吧?
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