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主题：【原创】等度洗脱与梯度洗脱的理解

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发表于：2024/08/30 17:06:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
等度洗脱，即是流动相比例不变，随洗脱时间逐渐将样品峰洗脱下来，前提是样品中各个组分与填料的吸附强度差别不是很大。

梯度洗脱，是流动相的比例随时间不断同方向变化，也就是洗脱强度大的一相比例逐渐增大，将样品峰逐个洗脱下来。样品中各组分与填料的吸附强度差异很大时须用到梯度洗脱。

我们在追求高柱效时，梯度洗脱也会给我们一个比较好的结果，梯度洗脱的峰型往往很尖锐，不管出峰多靠后，梯度的斜率越大，越尖锐。而等度洗脱的峰型，保留时间越长，峰展越宽。这是因为等度洗脱这个流动相比例，刚好可以将样品峰洗脱下来，但是需要时间，是在时间的帮助下慢慢从柱头走到柱尾，这种情况就会扩散比较严重。而梯度洗脱，样品进入柱子后，初始比例的流动相不足以让样品从填料上洗脱下来，即停在柱头附近，当流动相比例达到其中一个组分的洗脱强度时，这个组分就会快速通过色谱柱，当比例达到下一个组分的洗脱强度时，又快速洗脱下来一个峰，因此避免了扩散现象。

等度洗脱的保留时间往往没有梯度洗脱的保留时间稳定。这种情况可能由多种因素导致，比如等度洗脱样品峰在色谱柱中运动时间长，变数就多；峰展宽也会造成一定的偏差。而梯度洗脱，只要泵的比例精确度不差，出峰的时间就很稳定。


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