主题：【第六届原创】国标控，带你解析《婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定》

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xiongbb

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发表于：2011/12/04 20:50:13 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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直接上国标咯，呼呼~

维生素B1（硫胺素）

中文名称：维生素B1，硫胺素

英文名称：Vitamin B1，Thiamine

其它名称：氯化3-[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)-甲基]-5-(2-羟基乙基)-4-甲基噻唑

定义： B族维生素之一，辅酶形式是焦磷酸硫胺素(TPP)。缺乏它会引起脚气病，也可能涉及神经组织中阴离子通道的调节，与抗神经炎有关。

物理性质

外观：为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭，味苦，有引湿性，露置在空气中，易吸收水分。

熔点： 248-260℃

溶解性：极易溶于水（1：1）。溶于乙醇、甘油和丙二醇。不溶于乙醚和苯。

化学性质

CAS号： 59-43-8

分子式： C12H17N4OS+

分子量： 377.27

硫胺不够稳定，遇热、紫外线、氧气都会发生化学反应，分解或变质。硫胺可以溶于水，不溶于醇等有机溶剂。常温下在pH为3.5的水溶液中稳定，而在中性和碱性溶液中会发生分解。通常会被制作为盐酸盐、硝酸盐等形式，水溶性。和所有B族中的维生素一样，多余的B1不会贮藏于体内，而会完全排出体外。所以，必须每天补充。

样品前处理

1、称取5g~10g（精确至0.01g）试样于150mL三角瓶中，加入60mL0.1mol/L盐酸，充分摇匀；
2、用棉塞和牛皮纸封口，放入高压灭菌锅内，在121℃下保持30min，待冷却至40℃下取出，轻摇数次；
3、用2.0mol/L乙酸钠溶液调PH值至4.0左右，加入2.0ml混合酶溶液，摇匀后，置于37℃培养箱中过夜；
4、将酶解液转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，用定量滤纸过滤，取滤液再经0.45um滤膜过滤，取滤液备用。
5、将酶解液转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，用定量滤纸过滤，取滤液再经0.45um滤膜过滤，取滤液备用。
6、取上述滤液10.00mL于25mL具塞比色管中，加入5mL碱性铁氰化钾，充分混匀后，加10.00mL正丁醇，强雷震荡后静置约10min，充分分层，吸取正丁醇相于4000转/分钟~6000/转分钟离心，取上清液经有机微孔滤膜过滤，供进样用。

色谱条件

色谱柱：C18柱，反相色谱柱，4.6*250,5μ；（推荐AgelaXBP-C18 、岛津ODS-2）
保护柱：C18 5um, 4.6*10mm

流动相：0.05M乙酸钠溶液：甲醇=65:35

检测器：荧光检测器

检测波长：激发波长375nm，发射波长435nm

流速：1.0mL/min

进样量：10uL

色谱图

维生素B1标准品1.0ug/mL