主题：【原创】细菌检测设备知多少？

一、酶底物法的检测设备包括：
1. DST酶底物法主要配置(定量检测)
（1） 国产程控定量封口机（含51孔及97孔定量盘橡胶托垫）  1台 
（2） 6瓦特366nm进口紫外灯（98-20951-00）                1个
（3） 紫外线护目镜                                        1个
（4） 97孔阳性比色盘                                      1个
（5）底物法科立得试剂（规格：200个/盒）                  600个
（6）100ml无菌取样瓶（规格：200个/盒）                  600 个 
（7） 97孔定量盘（规格：100个/盒）                        600个 
2. DST酶底物法科立得技术参数
（1）方法依据：符合饮用水国家标准分析方法、EPA方法，采用固定酶底物技术法。
（2）检测项目：总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌
（3）培养时间：24小时
（4）培养基：MMO-MUG（固定底物酶底物法）
（5）检测类型：可完成100ml水样定性或定量检测
（6）灵敏度： 1～2419MPN/100ml水样（97孔定量盘）
            1～200MPN/100ml  水样（51孔定量盘）
            1MPN/100ml水样（定性）
3、国产程控定量封口机技术指标性能（99-10896-CN）：
（1）可靠性： 无漏液，无破孔
（2）噪音：＜50 dba @ 2 ft；
（3）重量：＜17公斤；
（4）处理速度：＜15秒/样品
（5）预热时间：＜15分钟；
（6）加热温度(内辊)：200℃±10℃；
（7）外罩温度 ：＜40℃；
（8）工作电压： 220V±10%
（9）工作环境温度： -10℃～50℃。

二、辅助设备：
1、超净工作台（单人单面）
1.1 配置要求
  水平流形不锈钢工作台面，便于清洗操作方便。确保样品不受污染，在无尘无菌下操作。  低噪声风机，轻触式风量操作系统，风速多级可调，确保操作区域风速始终处于理想状态。 安全开关设计，当日光灯开启时，均无法启动UV紫外灭菌灯，以保护操作者之安全。 高效率过滤器，能过滤到0.3um以上微尘。  UV紫外线灯灭菌，消除任何微生物污染隐患。
1.2主要技术参数
洁净等级：IS0 5级，100级（美联邦209E）
过滤效率：≥0.3um
振动/半峰值：≤3um
平均风速≥0.3m/s(可调)
菌落数≤0.5个/皿•时(φ90mm培养平皿)
噪音≤62dB
照度≥300LX
外形尺寸：900×700×1450mm
工作尺寸：820×480×600mm
高效过滤器规格820×600×50mm
荧光灯/紫外灯规格及数量20W/20W
这个单人单面的价格较低，约1万左右。

2、培养箱

型号：DHP9052
加热方式：电热膜
功率：250W
内胆尺寸W*D*H(mm)：360×350×420
定时范围：1～9999min
温度分辨率：﹢0.1℃
恒温波动度﹢0.5℃
控温范围：RT+5～65℃(RT指室温)

三、检测方法
1、材料与试剂：
  本试验中酶底物法采用固定底物技术（DST，defined substrate technology），其MMO-MUG培养基3、试验材料和仪器由爱德士公司提供。其它所用培养基与试剂按《地表水环境质量标准方法》GB3838-2002准备和配置。
2、测试方法：
  固定底物酶底物法采用97孔定量盘，此方法是一种基于MPN的方法。检测所需水样为100mL。用100 ml的无菌取样瓶量取100 ml水样，加入科立得TM（ Colilert®）试剂，混摇均匀使之完全溶解，将水样全部倒入97孔无菌定量盘内，以手抚平定量盘背面以赶除孔穴内气泡，然后用封口机封口2。放入44.5℃±0.2℃培养箱中培养24小时后进行结果判读，如果结果为可疑阴性，可延长培养时间到28小时，超过28h之后出现的颜色反应不作为阳性结果2。将培养24小时之后的定量盘取出观察，如果孔穴内的水样变成黄色则表示该孔穴中含有粪大肠菌群（耐热大肠菌群）。计算有黄色反应的孔穴数，对照MPN表查出其代表的粪大肠菌群（耐热大肠菌群）最可能数。

在环保部监测站的建设标准中所说的“细菌检定分类系统”或者如老兵所说的“细菌检测分类系统”,在国内监测站很多都是用这2002年第四版水和废水监测方法来做。下面监测站报数还是多以多管发酵法做的来报数。这个产品确实很方便快捷，但是在环保部门还没有将其确定为标准，虽然有一些市站做个一些该产品的等效性试验实验数据也不错，此外GB5750-2006饮用水检测标准也有写过酶底物法。如果像老兵说的这个系统能以标准形式在环保部门确定下来，这个方法在下面监测站也就好推广了。当然标准确定也是个很复杂的事情，要考虑很多方面。希望有机会能与老兵多交流，从你的帖子中学到了不少的东西。

该方法被环保部门确定为HJ标准是早晚的事。GB3838-2002正在修订，也许标准中的粪大肠菌群会改称为耐热大肠菌群，配套的方法要么直接引用GB5750-2006饮用水检测标准的酶底物法，要么出台HJ标准方法。在没有被环保部门确定为HJ标准之前，该法可以GB5750-2006的方法申请认证。

无论定性还是定量操作上就这么简单，所有器皿均为一次性使用，省去了洗涤灭菌操作的烦恼。

谢谢您的分享~

微生物检测这一块我们还没开展起来，也准备下一步扩项时候开展，现在都是分包出去