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主题：【分享】液相色谱柱固定相的选择【12月版主推荐：可就真实实验经历挖掘精彩讨论】

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三人行

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发表于：2012/12/25 12:05:49 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

固定相的选择

分离中等极性和极性较强的化合物可选择极性键合相。氰基键合相对双键异构体或含双键数不等的环状化合物的分离有较好的选择性。氨基键合相具有较强的氢键结合能力，对某些多官能团化合物如甾体、强心甙等有较好的分离能力；氨基键合相上的氨基能与糖类分子中的羟基产生选择性相互作用，故被广泛用于糖类的分析，但它不能用于分离羰基化合物，如甾酮、还原糖等，因为它们之间会发生反应生成Schiff 碱。二醇基键合相适用于分离有机酸、甾体和蛋白质。

分离非极性和极性较弱的化合物可选择非极性键合相。利用特殊的反相色谱技术，例如反相离子抑制技术和反相离子对色谱法等，非极性键合相也可用于分离离子型或可离子化的化合物。ODS(octadecyl silane)是应用最为广泛的非极性键合相，它对各种类型的化合物都有很强的适应能力。短链烷基键合相能用于极性化合物的分离，而苯基键合相适用于分离芳香化合物。

另外，美国药典对色谱法规定较严，它规定了柱的长度，填料的种类和粒度，填料分类也较详细，这样使色谱图易于重现；而中国药典仅规定填料种类，未规定柱的长度和粒度，这使检验人员难于重现实验，在某些情况下还浪费时间和试剂。

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2012/12/25 12:46:23 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这些都是LZ的经验总结吗，很好很专业啊

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三人行

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2012/12/25 13:01:48 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 suyirumo(suyirumo) 发表:
这些都是LZ的经验总结吗，很好很专业啊

这些都是资料收藏。

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suyirumo

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2012/12/25 13:16:45 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

都是好资料啊一直就不太明白氰基柱有什么用这下明白了下次碰到可以试试

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爱涂涂

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2012/12/25 14:21:56 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有没有实际例子，有例子才更有说服力··

或者跟我分享下实际过程的经验呗

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2012/12/26 11:40:15 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 爱涂涂(yuzhh) 发表:
有没有实际例子，有例子才更有说服力··

或者跟我分享下实际过程的经验呗

氰基柱使用注意事项：

氰基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的，这一点不能忽略。对于新购柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，避免缓冲盐的析出。

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2012/12/27 11:58:48 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 爱涂涂(yuzhh) 发表:
有没有实际例子，有例子才更有说服力··

或者跟我分享下实际过程的经验呗

可以参考Venusil MP C18 Vc异构体的分离

色谱条件：
色谱柱：Venusil MP C18 5 μm 100 . 4.6×250 mm
样品：0.512 mg/mL L-抗坏血酸和0.506mg/mL D-异Vc钠的混合物（2%偏磷酸溶解）
流动相：0.005 mol/L磷酸二氢钾溶液（磷酸调节pH值至2.0）
流速：0.5 mL/min
柱温：20 ℃
波长：245 nm
进样：1 μL
Venusil MP C18是真正的100%水相C18色谱柱！是特别为极性和中等极性化合物而设计开发的反相色谱柱。可以取代传统的离子对方法。

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爱涂涂

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2012/12/27 16:52:51 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 爱涂涂(yuzhh) 发表:
有没有实际例子，有例子才更有说服力··

或者跟我分享下实际过程的经验呗

氰基柱使用注意事项：

氰基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的，这一点不能忽略。对于新购柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，避免缓冲盐的析出。

恩恩，而且最好不要正反相来回冲，对柱子不好

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