主题：【第六届原创】葛花及葛花提取物中总酚酸含量的测定

浏览0 回复66 电梯直达

haiyang

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2013/11/23 10:21:43 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

该帖子已被xufangdan设置为精华；

维权声明：本文为labin原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。

葛花及葛花提取物中总酚酸含量的测定

葛花（Flos Puerariae）为豆科植物野葛[Pueraria lobata(wild) ohwi]的干燥花蕾。广泛分布于湖南、河南、广东等省。具有解酒醒脾保肝的功效,主治伤酒发热烦渴、不思饮食、呕逆吐酸、吐血、肠风下血等症。葛花是中国的传统中药，用于解酒缓解酒后呕吐等症状，临床上具有显著疗效。

总酚酸具有抗血栓形成、溶纤和抗脂质过氧化的作用，是治疗心肌缺血、心绞痛、心肌梗死等心血管疾病的有效成分。葛花中含有多种有效成分，但国内鲜有关于葛花中总酚酸方面的报道。因此测定葛花及葛花提取物中总酚酸的含量有其研究的价值。

目前在我国含葛花的解酒方剂主要有葛花解酒汤、酒速愈用于临床，以及葛花茶、葛花露等保健品上市。葛花这一传统中药还有待进一步研究，以期开发出新的药物剂型和保健品，使其在医疗、保健等方面开辟更广阔的用途。

本文利用分光光度法测定葛花及葛花提取物中总酚酸的含量，方法简单快捷，重现性好，可作为总酚酸检测的质量标准。

实验部分

1. 药品与仪器

药品

葛花：购自药店。

没食子酸对照品：中国药品生物制品检定所。

浓盐酸，95%乙醇，十二烷基硫酸钠，FeCl₃，K₃[Fe(CN)₆]，

均为分析纯试剂。

仪器

HW2-II电热恒温水温箱 (北京市医疗设备厂)

SHZ-D3循环水式真空泵（上海双迅仪器有限公司）

YHG-9023A台式电热恒温鼓风（上海姚氏仪器设备厂）

分析天平（万分之一）（梅特勒）

721分光光度计（上海索域设备有限公司）

2 实验方法

对照品溶液的配制

精密称取干燥至恒重的没食子酸对照品23.2mg,加入100mL无水乙醇稀释至0.232mg·mL^-1,移取10mL,加入90mL乙醇稀释十倍，制成23.2μg·mL^-1溶液，用乙醇1:1倍稀释后作为对照品溶液备用。

供试品溶液的制备

生药溶液的制备取药材约0.1g精密称定置于25mL比色管中，用蒸馏水浸泡1.5h，沸水浴提取40min，冷却后倒出上清液。残渣再重复上述操作二次。合并三次提取液，和药渣一起转移到100mL容量瓶中，用水定容到刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液10.00mL，用无水乙醇定容到20mL备用。

葛花提取物的制备称取葛花600g，干燥、粉碎，用80%乙醇溶液浸泡3d，80℃水浴提取2h，随时搅拌，转移提取液，残渣重复提取2次，每次1h。提取液合并，过滤，滤液减压蒸馏，浓缩为浸膏。

葛花浸膏用水饱和的正丁醇浸泡提取，随时搅拌，提取多次至提取液几乎无色，合并正丁醇提取液，抽滤，将滤液减压蒸馏浓缩，加入乙醚即有大量沉淀生成，经乙醚反复脱脂后得淡棕色沉淀物，抽滤，冷冻干燥，得葛花提取物25g。

将葛花提取物于80℃干燥，取约0.1g，精密称定，用无水乙醇定容到50mL容量瓶中，取出5.00mL用无水乙醇稀释十倍备用。

吸收曲线的绘制

取没食子酸对照品溶液1mL，置于25mL比色管中，加无水乙醇至5.00mL，加入0.3%十二烷基硫酸钠2.00mL，加入0.6%FeCl₃-0.9%K₃[Fe(CN)₆](1:0.9)混合溶液1mL，混匀，在暗处放置5min，加0.1mol·L^-1 HCl至刻度，混匀，在暗处放置20min。，在400-800nm波长范围内扫描。以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线。如图

标准曲线的绘制

精密吸取没食子酸对照品溶液0.50，1.00，1.50，2.00，2.50，3.00mL，分别置于25mL比色管中，按“2.3 吸收曲线的绘制”方法显色，用721分光光度计于740nm波长处依次测定吸光度，以含量c为横坐标,吸光度Ａ为纵坐标绘制标准曲线。回归方程A=0.4809c+0.0223, r=0. 9941,线性范围为8.30～49.8μg·mL^-1。如图。

总酚酸的含量测定方法

取供试品溶液1mL，置于25mL比色管中，加无水乙醇至5.00mL，加入0.3%十二烷基硫酸钠2.00mL，加入0.6%FeCl₃-0.9%K₃[Fe(CN)₆](1:0.9)混合溶液1mL，混匀，在暗处放置5min，加0.1mol·L^-1 HCl至刻度，混匀，在暗处放置20min。以随行溶剂为空白，用721分光光度计在740nm波长处测定吸光度。根据标准曲线计算含量。

3 测定方法考察

精密度试验取对照品溶液1.00mL于25mL比色管中，按“2.3 吸收曲线的绘制”显色，用721分光光度计于740nm波长处重复测定6次吸光度，计算这6次吸光度的RSD，分别为0.3%和1.2%。精密度良好。见表。

序号	1	2	3	4	5	6	RSD/%
没食子酸	0.364	0.363	0.364	0.366	0.365	0.366	0.3
葛花	0.430	0.424	0.425	0.431	0.434	0.421	1.2

稳定性试验吸取对照品溶液和供试品溶液各1.00mL于25mL比色管中，按“2.3 吸收曲线的绘制”显色，于740nm波长处每隔5min测定1次吸光度，计算吸光度的RSD，分别为1.4%和1.6%。对照品溶液和供试品溶液显色后在60min内稳定。见表。

时间(min)	对照品	供试品
5	0.356	0.169
10	0.358	0.168
15	0.360	0.165
20	0.365	0.167
25	0.365	0.165
30	0.366	0.166
35	0.370	0.169
40	0.370	0.169
45	0.371	0.175
50	0.372	0.176
55	0.373	0.178
60	0.376	0.177
RSD/%	1.7	1.6