主题:【讨论】有关能否用酶标仪代替紫外分光光度计

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五少
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因检测通量较大,最终老板决定买一台全波长的酶标仪缓解分光光度计的压力。前几天设备终于来了是MD的190全波长酶标仪,来了时候就开始测试。因设备自带pathcheck功能可将结果转化成1cm光径OD,但是使用以来发现问题来了:1在利用全波长酶标仪测定磷含量的的时候(波长700nm)测定的结果和紫外分光光度计比较(标曲浓度0.2、0.4、0.6...1.4mg/L)后面几个点数据基本没问题,但是0.2、0.4浓度的点两边数据差别较大,在低浓度下酶标仪检测OD值较分光光度计检测ABS值明显低了很多。然后用酶标仪测定植物酶活(两组实验,分别设置灭活组和非灭活组测定两者吸光值只差),波长为540nm,结果发现用紫外测定时灭活组和非灭活组数据有明显差异且两组数据正常,但是用酶标仪的话灭活组和非灭活组数据差别不大,数据都偏小。所以不敢使用酶标仪检测,还是使用分光光度计检测。等弄清楚问题在用酶标仪,群里有人对这一块熟悉么?
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高冷病患者
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五少
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这个和标准没关系吧,而且我认证的项目也不会这么操作。
omjia
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原文由 五少(v3241778) 发表:
这个和标准没关系吧,而且我认证的项目也不会这么操作。


不用标准方法,你们的数据客户接受吗?
虽然两者都可以测吸光度的,但是工作原理还是有区别的吧?可以联系一下酶标仪的工程师,看不同之处是什么原因造成的。
西瓜猫猫西瓜
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应该是你们做的这个方法不太适合改设备吧
所以说,按照检测方法的要求选择设备是很重要的
很多设备的参数和原理不一样呀,虽然测同一个参数,但是结果还是会出现差异性
杨庆茂
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您好!我是负责BioTek酶标仪的技术人员,酶标仪就是全波长吸收光检测就是相当于一台分光光度计,完全可以取代分光光度计的。
鉴于你实验出现的问题,我有两点分析建议:
1.分光光度计是用石英玻璃皿,对光几乎没有吸收;但是酶标仪使用的孔板一般是塑料的,对光有一定吸收,所以需要设置一个空白对照孔。
2.酶标仪也有检测下限,超出检测范围可能就不准了;但是一般酶标仪是很精准的,可以精确到万分之一OD。
Ins_f6e92ca4
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原文由杨庆茂(Ins_ca0b70d4)发表:您好!我是负责BioTek酶标仪的技术人员,酶标仪就是全波长吸收光检测就是相当于一台分光光度计,完全可以取代分光光度计的。
鉴于你实验出现的问题,我有两点分析建议:
1.分光光度计是用石英玻璃皿,对光几乎没有吸收;但是酶标仪使用的孔板一般是塑料的,对光有一定吸收,所以需要设置一个空白对照孔。
2.酶标仪也有检测下限,超出检测范围可能就不准了;但是一般酶标仪是很精准的,可以精确到万分之一OD。
您好!我想了解一下酶标仪在波长630nm走板测试的ABS值与OD600是否相等呢?
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