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记一次质谱仪调谐
为了保证我们实验的准确性和灵敏度,每个季度我们都会对仪器进行校机工作,而且在长期停机后,或发现样品信号降低时进行调谐工作。之前工程师为我们详细教学了调谐流程,现在分享给大家。
我们的仪器在买来时自带了仪器参数及调谐的方法文件。每次我们在校机结束,都会将调谐后的数据文件保存至Service文件夹。如果仪器灵敏度出现异常,我们会先备份API Instrument文件,后将Service文件夹的API Instrument文件夹覆盖至D盘数据里。
我们的调谐液选用的是质谱仪专用的调谐液,不同型号的质谱仪所使用的的调谐液浓度是不同的,对于3200、3500系列质谱仪,正离子调谐液选用Pos PPG,1 E-5M,负离子调谐液选用Neg PPG,3E-4M;4000、4500系列质谱仪,正离子调谐液选用Pos PPG,2 E-6M,负离子调谐液选用Neg PPG,3E-4M;5500、6500系列质谱仪,正离子调谐液选用Pos PPG,2 E-7M,负离子调谐液选用Neg PPG,3E-5M;因此浓度高的调谐液可以用指定稀释液稀释至浓度低的调谐液。
若需稀释调谐液,可按以下步骤配置稀释液:
正离子稀释液:
1)称取15.4mg乙酸铵,溶入49.9ml去离子水中,轻摇使之完全溶解;
2)量取49.9ml甲醇,加入0.1ml甲酸,再加0.1ml乙腈;
3)将上述两溶液混合,即正离子稀释溶液。
负离子稀释液:
1)称取385 mg乙酸铵,溶入49.9 ml去离子水中,轻摇使之完全溶解;
2)量取49.9 ml甲醇,加0.1 ml甲酸,再加0.1 ml乙腈;
3)将上述两溶液混合,即负离子稀释溶液。
下面介绍PPG调谐流程:首先需要用质谱仪自带的针泵用注射器将吸取响应的PPG调谐液泵入质谱仪;
在Analyst软件中,选择Hardware Configuration中激活Mass Only。
在Manual Tuning中运行相应的采样方法,例如打开Q1 Pos PPG方法。注意事项:若双击Manual Tuning时,弹出提示窗口:“Please reserveinstrument for tuning”,点击OK,再次双击Manual Tuning,便能进入调谐界面。
设置针泵直径(Syringe Diameter),流速(Flow Rate),运行针泵(Start Syringe Pump)
点击Start运行方法,待TIC稳定后,采集10MCA数据, 并打开谱图。右键点击任意一张谱图,选择List Data,在弹出的表格里选择 Calibration Peak List,观察参数。Intensity:仪器型号不同,Intensity要求也不同,请参考装机数据,Width:在0.6-0.8Da范围内,MassShift:在+-0.1Da范围内。
这里我们需要注意:
若上图的表格里不显示Calibration Peak List,则按下图方法操作:点击 Tools -Setting - Appearance Options - Miscellaneous - 勾选ShowMass Calibration Peak List
这里我们需要注意::
若表格里大部分信息显示N/A,则有可能选择的校正表不正确,这时,右键点击表格,选择相应的校正表,例如正离子调谐选择:PPGs Pos Calibratiion Ref - Use as Reference
半峰宽(FHWM)调整:半峰宽应在0.6-0.8Da范围内,若不在此范围,可通过调节Offset值来调整半峰宽,调节幅度是0.003-0.005,请勿大幅度调节Offset值
这里我们需要注意::上图的Offset值仅供参考,每台仪器的Offset值都不一一样,请根据实际情况对Offset值进行相应调整。
质量轴(Mass Shift)校准:质量轴应在+-0.1Da范围内,若不在此范围,选中任意一张谱图,点击Calibration From Spectrum进行校准。
调谐完成后,保存数据文件的注意事项,如果Analyst软件询问是否“Save changes made in ManualTuning to the Instrument data file”,请选择“Yes”以保证调谐参数更新。但如果询问“Do you want to save the current tuning acquisition method?”,请选择“No”以防止仪器方法参数被改变。
今天的质谱仪调谐分享到此结束,本文部分图片来自内部培训教材,感谢仪器信息网提供原创大赛的平台让我们提高!