1.内标一般来说分为两种类型,即结构类似物内标和同位素标记内标。
A.结构类似物内标
① 结构类似物内标最好与分析物具有相同的关键化学结构和官能团(如-COOH.-SO2.-NH2等)差别仅限于C-H部分,如果关键化学结构和官能团不同,会导致离子化效率和回收率的差异。
② 类似物内标不应该和待测物的在体内的任何代谢产物相同,避免对检测结果产生影响。
B.同位素标记内标(SIL-IS)
① 13C和15N标记的内标优于氘(2H/D)标记的内标。
② 选择氘代内标时,要注意氘原子取代的位置,应当选择取代稳定官能团结构的位置(例如-CH2-CD3),而不是具有较活泼化学性质的位置(例如-CD2-(COOH)2),以确保样品在制备过程中不发生氘-氢交换。
③ 为了降低同位素干扰的影响,同位素内标最好至少要比未标记的分析物高出4-5个质量单位。
在实验对于方法的精密度,准确度和稳定性有要求的前提下,应尽可能使用同位素标记内标,而且相比类似物内标,SIL-IS能拓宽方法的线性范围。