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液相出峰重复性差?问题出在哪里?
前几天测陈皮药材,实验人员发现样品按照药典处理完3个重复,结果平行性较差。排查问题:1.
怀疑操作人员前处理操作不当,更换人员进行处理从称样到加入溶剂进行监督,样品结果依然不理想,平行性较差。2.
怀疑是仪器出了问题,采用重复对一个样品连续进样,连续进样峰面积差别比较大,数据如下:峰面积1 | 697439 |
峰面积2 | 1013844 |
峰面积3 | 1583984 |
峰面积4 | 861017 |
3.
因为保留时间也出现偏移,首先怀疑是色谱柱问题,排查色谱柱柱压是否稳定,经排查柱压浮动不大,在正常范围内。![]()
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4.
排查进样系统,发现进样洗针液管道抽空,洗针液管道有一大段气泡,最后发现是洗针液较少导致管道处在液面上,洗针过程中进入空气,导致样品进样量不准, 5.
加入一定量的洗针液,把洗针管放入页面下,对进样系统模块进行在线排气25分钟,重新进样问题解决。![]()
小结:
很多时候我们做样品出现各种小问题,只要是你认真排查,总会找出原因,大多数情况我们都会先考虑色谱柱的原因,柱压不稳,柱子进气泡导致重复性变差,实际上一些小部件或者容易忽略的操作也容易让数据出现异常。希望大家注意这些小细节:
(1)自动进样器排气 做完一周的样品,下次开机前最好进行一次排气,同时也可以清理管路。
(2)流动相滤头要隔一段时间清理一下(1-2月),尤其爱长菌的水相。