流式细胞仪(Flow Cytometry)是一种用于快速分析和分选细胞或微粒的技术。它能够同时测量通过仪器的单个细胞上的多个参数。流式细胞术可以用于检测以下几种类型的项目:
1. **细胞表面标记**:
- 测量特定细胞表面蛋白的存在和数量,如免疫细胞标志物(CD标记)、受体、抗原等。
2. **细胞内成分**:
- 分析细胞内的蛋白质(如转录因子、细胞周期蛋白)或酶活性。
- 检测细胞内染色质状态,用于细胞周期分析或DNA含量测定。
3. **细胞大小与复杂性**:
- 通过前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)来评估细胞大小和内部结构复杂度。
4. **细胞凋亡/坏死**:
- 使用特定的荧光染料(如Annexin V, PI, 7AAD等)来检测细胞凋亡或坏死的情况。
5. **细胞活力**:
- 用活/死细胞染色法区分活细胞和死细胞。
6. **细胞周期分析**:
- 利用DNA染色技术(如PI或DAPI)来分析细胞处于细胞周期中的哪个阶段。
7. **细胞增殖**:
- 通过检测DNA合成标记(如BrdU)或细胞分裂指数(如Ki-67)来评估细胞增殖情况。
8. **细胞信号通路活动**:
- 检测特定信号分子的磷酸化状态或其他修饰状态以研究信号传导途径。
9. **细胞分选**:
- 不仅可以分析细胞,还可以根据设定的标准分选出特定群体的细胞。
10. **其他**:
- 还可以用于检测细胞吞噬能力、细胞表面电荷、细胞膜流动性等。
使用流式细胞仪进行检测时,通常需要对样本进行适当的处理,包括固定、通透化、标记等步骤,并且选择合适的荧光标记抗体和其他试剂。每种检测项目都有其特定的方法和技术要求。