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液相色谱（LC）
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主题：【求助】高效液相色谱计算原样品含量

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发表于：2018/04/27 09:55:32 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我在用高效液相色谱测芒果苷含量，具体步骤是：取干燥叶片0.1g,加25ML甲醇（萃取剂），称重，超声提取后冷却，用甲醇补足失质量。旋转蒸发仪加热回流，蒸干物用甲醇溶解（这一步是补足失掉甲醇量还是定容到25ML？）,最后过滤，滤液体积v1，统一取滤液10ML进行液相色谱测。我只知道液相色谱可以测出芒果苷浓度，但是回归到叶片怎么计算芒果苷含量？哪些体积量是需要用到的。研一新手，实在是搞不懂，恳请大家帮助,谢谢！
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2018/4/27 11:07:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标准溶液是怎么处理的，用的是什么单位，芒果苷含量用什么单位表示？
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2018/4/27 11:08:27 Last edit by zx08052109
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2018/4/27 15:31:38 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 飘殇(zx08052109) 发表:
标准溶液是怎么处理的，用的是什么单位，芒果苷含量用什么单位表示？
用买的 芒果苷标准品配置对照品溶液，单位mg/ml
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moviehua
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2018/4/27 16:25:40 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
拿标准品配置不同浓度做标准曲线先，然后计算出样品浓度。
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夏天的雪
bingwang228
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2018/4/27 16:31:20 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
“用甲醇补足失质量。旋转蒸发仪加热回流，蒸干物用甲醇溶解”这一步的目的是什么？去除其他易挥发的有机成份？蒸干物用甲醇溶解这一步是要准确定容的，计算时用的到，既然蒸干物用甲醇溶解了，那么用甲醇补足失质量觉得没有必要。
计算含量可以先做标准曲线或者单点方法，依据得到的进样液中的浓度*定容体积/称重质量就可以了。注意单位之间的换算。
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m3127019
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2018/4/27 19:00:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主从哪看到的标准？缺东西吧！定容至容量瓶中都没有么？做标准曲线也是有条件的！必须使样品浓度落在标曲浓度范围内。
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2018/4/27 20:40:53 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
“用甲醇补足失质量。旋转蒸发仪加热回流，蒸干物用甲醇溶解”这一步的目的是什么？去除其他易挥发的有机成份？蒸干物用甲醇溶解这一步是要准确定容的，计算时用的到，既然蒸干物用甲醇溶解了，那么用甲醇补足失质量觉得没有必要。
计算含量可以先做标准曲线或者单点方法，依据得到的进样液中的浓度*定容体积/称重质量就可以了。注意单位之间的换算。
你好，谢谢回复，首先蒸干物粘在蒸馏瓶上，必须用甲醇将其溶解下来，所以我这一步的疑问就是要用多少甲醇（是加原来蒸掉的甲醇量还是定容到20ML）。其次，我的最后一步是用溶剂过滤器（带微孔滤膜）过滤溶液，得到的溶液体积就低于原来定容的20ML，这个数值在计算含量时需要用到吗（我的顾虑在不可能过滤完溶液再去量一下他的体积然后在放到离心管中保存把）？ 不好意思，我是第一次做天然有机物提取实验，问题比较多，特别感谢你的回复！
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2018/4/27 20:43:19 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 m3127019(m3127019) 发表:
楼主从哪看到的标准？缺东西吧！定容至容量瓶中都没有么？做标准曲线也是有条件的！必须使样品浓度落在标曲浓度范围内。
是称取芒果苷标准品26.3mg,置于100ML容量瓶中，加40%甲醇溶解并定容至刻度，我在提问中没有详细写，
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夏天的雪
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2018/4/28 8:39:20 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 17071608(Ins_db35a5e7) 发表:
你好，谢谢回复，首先蒸干物粘在蒸馏瓶上，必须用甲醇将其溶解下来，所以我这一步的疑问就是要用多少甲醇（是加原来蒸掉的甲醇量还是定容到20ML）。其次，我的最后一步是用溶剂过滤器（带微孔滤膜）过滤溶液，得到的溶液体积就低于原来定容的20ML，这个数值在计算含量时需要用到吗（我的顾虑在不可能过滤完溶液再去量一下他的体积然后在放到离心管中保存把）？ 不好意思，我是第一次做天然有机物提取实验，问题比较多，特别感谢你的回复！
旋蒸的目的就是浓缩，如果加到原来的量，就没有意义了，应该定容到20mL就行；溶剂过滤器是为了过滤杂质，防止颗粒物进入液相，这个体积是不影响的，
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夏天的雪
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2018/4/28 8:41:08 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 17071608(Ins_db35a5e7) 发表:
是称取芒果苷标准品26.3mg,置于100ML容量瓶中，加40%甲醇溶解并定容至刻度，我在提问中没有详细写，
我觉得这步都不一定要定容，这步是提取的过程，提取液在后续会被浓缩掉，提取液的多少会影响提取效率以及后续的挥发时间，一次提取，不如少量多次提取
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m3127019
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2018/4/28 9:04:44 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 17071608(Ins_db35a5e7) 发表: 是称取芒果苷标准品26.3mg,置于100ML容量瓶中，加40%甲醇溶解并定容至刻度，我在提问中没有详细写，
你这是对照品，我说的是样品哦？样品没有定容至多上ml么？
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