主题:【原创】BP 2015方法|复合维生素注射液的定量分析(1)——维生素B1、维生素B6及烟酰胺的分析

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capcellpak
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BP 2015方法|复合维生素注射液的定量分析(1)

——维生素B1、维生素B6及烟酰胺的分析



复合维生素注射液




用于营养不良及因缺乏维生素B类所引起疾患的辅助治疗,如厌食、脚气病、糙皮病等。

维生素B1又称硫胺素,是碳水化合物代谢所需辅酶的重要组成成分。
维生素B6为多种酶的辅基,参与氨基酸及脂肪的代谢。
烟酰胺为辅酶的组分,为脂质代谢、组织呼吸的氧化作用和糖原分解所必需。
右泛醇(D-泛醇)又称原维生素B5,进入人体内能转化为泛酸,进而合成辅酶A,促进人体蛋白质、脂肪、糖类的代谢,保护皮肤和粘膜,改善毛发光泽,防止疾病的发生。

(以上列出组分为配方中部分成分,本数据仅介绍前三种化合物的分析,下期将介绍右泛醇的分析数据)

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客户提供了复合维生素注射液样品及维生素B1、维生素B6和烟酰胺对照品溶液,并反馈在现有条件下使用C18柱对注射液中维生素B1、维生素B6和烟酰胺进行定量分析时,烟酰胺出现杂质干扰,无法准确定量。客户希望本实验室参考BP2015英国药典方法,筛选合适的色谱柱对复合维生素注射液中的维生素B1、维生素B6和烟酰胺进行定量分析。

依据BP 2015方法,流动相中添加了二乙胺和庚烷磺酸钠,本实验室分别尝试了中等极性的CAPCELL PAK C18 MGII、高极性的CAPCELL PAK C18 AQ、高碳载量的SUPERIOREX ODS以及低极性的CAPCELL PAK C18 UG120色谱柱分别对注射液样品进行分析。
如图1,对几款柱子分析所得结果对比后发现,能在纯水相条件下稳定使用的高极性色谱柱CAPCELL PAK C18 AQ所得分离效果最佳,其中,烟酰胺与前后杂质分离度在0.9以上,满足BP方法中不低于0.8的分离度要求。



图1 CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱分析所得结果

注:峰上标数字为分离度,下同。

就该结果与客户沟通,客户希望对液相条件进行适当调整,在满足英国药典要求的基础上,进一步实现烟酰胺与其前后杂质之间的基线分离。
首先,我们考察柱温对分离的影响——分别在30°C、35°C、40°C柱温条件下考察分离效果,发现仍在原条件,即30°C条件下分离效果最佳;进一步,尝试调整流动相中有机相的比例,将原条件中各10%的甲醇和乙腈均降低至6%,如图2,烟酰胺与其先后杂质峰之间分离度均在1.70以上,能够得到基线分离的良好结果。





图2 CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱分析所得结果(调整条件)



图3 CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱分析所得结果(调整条件)局部放大图



综上实验结果,使用能在纯水相条件下稳定使用的高极性色谱柱CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm,依据BP 2015英国药典方法,通过调整流动相中有机相比例,能够实现复合维生素注射液中维生素B1、维生素B6和烟酰胺及杂质的良好分离及准确定量分析。


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capcellpak
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明天将会发布BP 2015|复合维生素注射液的定量分析(2)——右泛醇哦~敬请期待~
逆天一棍
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话说,注射液的话,不是要研究降解杂质的吗,这一块儿准备如何解决呢?
capcellpak
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原文由 逆天一棍(fengmo4668) 发表:
话说,注射液的话,不是要研究降解杂质的吗,这一块儿准备如何解决呢?


您好~首先感谢您的关注与支持~
关于您提的降解杂质问题,因为我们是色谱柱的生产厂家,对于注射剂的制造工艺和降解杂质等相关情况不是特别清楚,非常抱歉呢~
不过如果您有液相分析方法建立方面需求,或者遇到了液相方面的问题,可以随时和我们联系哦~
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