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液相色谱（LC）

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主题：【求助】液相色谱柱的安装和使用

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发表于：2019/02/24 22:53:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相反向色谱柱的安装应该注意什么事项，为何有时会漏液，安装的接头跟方式如何？

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2019/2/25 9:44:49 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1)将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱，并完全排出流路内的空气。

装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下，使用双方都能相溶的液体做过渡。比如从水置换到氯仿的情况，就需要使用丙酮做过渡，才能完全置换。

将盐溶液置换成有机溶剂的时候，需要通过纯水、丙酮的顺序来进行置换。相反，从有机溶剂转换成盐溶液的情况下，需要通过丙酮、纯水的顺序置换。

不仅仅是泵，流动相流动的所有流路都必须进行置换。例如，注入样品的情况，软管内的液体也需要置换。另外，如果使用压力计等别的软管的情况，取下来的管子也必须由流动相洗净后才能继续使用。

2)色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下，色谱柱的出入口可能会有空气残留。这种情况下，必须先把空气完全排出后才连接到装置中。

避免快速加热，加热温度不要超过色谱柱的最高负荷温度。

把柱子入口侧的螺栓打开，然后加温(一般加温到手心感到温暖的程度就足够了)，等液体满出来以后接到装置上。然后，打开出口处的螺栓，用泵送液，等确认出口处有液体流出后，连接到装置中。这样操作，就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。

3)在泵运作的时候连接色谱柱。确保能让流动相按照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。

4)色谱柱加温使用的时候，先用0.2～0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。达到所定温度后，再渐渐的增加流量至测定流量。

5)色谱柱需要安定时间。连接到装置中立即进行测试的情况下，第一次很难得到好的分析结果。

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