快速导航采购仪器提醒

液相色谱（LC）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

主题：【已应助】液相峰出现牛角峰

浏览0 回复18 电梯直达

Insm_be373d7d

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2020/10/04 15:48:28 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

近期做的一个项目中流动相使用的是PH3.0的磷酸盐和乙腈和水，出现了好多问题，有时找不到原因
问题1：配制流动相时一次性配制4升，所以会将溶解好的溶液先倒入大瓶子中，然后再加入别的，有时不小心撒了一些，有时没出现问题，有时标准品出现了牛角一样的峰型，洒了一些改变的是比例，会使峰分裂么？
问题2：乙腈的加法有没讲究，我们试过分开过滤再加和乙腈稀释过后加入一同过滤？主要影响的是出峰时间，哪种更好
问题3：分开过滤后再加乙腈又出现了标准峰变成牛角的问题？会是这个引起的么？
问题4：不同人的配制过程已经出现了好几次，确定配比没错而峰却又分裂的问题，找不出问题在哪。以往出峰时间晚了就多加人一点乙腈会使得峰提前，最近一次也是峰出晚了，补加了点乙腈就又出现了峰的峰型分裂成牛角。
检测过程使用的是安捷伦仪器，压力一般比较稳定。检测新人被这个问题困扰很久，希望有前辈可以帮忙解决这个问题
一开始是两个大小接近的分裂峰，后来把流动相重新混匀再测只有保留时间提前，之后有卸了预柱出现了一大一小的分裂峰

推荐答案：dadgoh回复于2020/10/04

1.如果流动相走的是是等比例，可以先将流动相混均后再过膜脱气。
2.这俩图的保留时间不一样，说明你们走的流动相是有变化的。
3.上一张正常的图，大家好给你分析原因。

4
赞贴
18
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

专属顾问快速对接

获取验证码

立即提交

相关阅读

lsyecspc

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 16:14:35 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最好是用四无泵，分别过滤后使用两个流路在线混合。如果使用先混合再过滤，抽滤时乙腈会因为易挥发损失一些，造成比例不准确。如果要分开过滤再混合，容易造成混合不均匀。如果液相没有带脱气机也溶易出现气泡。峰分叉可能是因为流动相不无效造成的。

赞贴

拍砖

dadgoh

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 16:17:11 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

赞贴

拍砖

Insm_be373d7d

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 17:01:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:1.如果流动相走的是是等比例，可以先将流动相混均后再过膜脱气。2.这俩图的保留时间不一样，说明你们走的流动相是有变化的。3.上一张正常的图，大家好给你分析原因。

正常是这样子

赞贴

拍砖

Insm_be373d7d

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 17:02:31 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:1.如果流动相走的是是等比例，可以先将流动相混均后再过膜脱气。2.这俩图的保留时间不一样，说明你们走的流动相是有变化的。3.上一张正常的图，大家好给你分析原因。

是等比例，有重新混匀，但没有重新过膜，重新过膜是可以改善什么方面呢

赞贴

拍砖

Insm_be373d7d

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 17:04:00 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 lsyecspc(liushuyong) 发表:最好是用四无泵，分别过滤后使用两个流路在线混合。如果使用先混合再过滤，抽滤时乙腈会因为易挥发损失一些，造成比例不准确。如果要分开过滤再混合，容易造成混合不均匀。如果液相没有带脱气机也溶易出现气泡。峰分叉可能是因为流动相不无效造成的。

比例确实会不准，我们纠结的问题是比例不准会不会是引起峰分裂的原因，因为时而出问题，时而正常的

赞贴

拍砖

sdlzkw007

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 18:02:11 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

建议你们把两个或者三个流动相分别配制、抽滤，然后使用仪器的在线混合功能尝试一下，多做对比，按照差异分析问题。个人觉得你们的问题在于1）流动相比例不准确2）流动相预混合不正确，理论上需要把混合的两个或者三个流动相分别配制好，然后混合在一起超声、抽滤，根据使用条件控制总量不超过10个小时，到时间之后需要重新制备。以便控制实验条件的一致性。注意同比例的2个流动相在线混合比预混合的出峰时间会晚一些。

赞贴

拍砖

Insm_be373d7d

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2020/10/4 18:46:44 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:建议你们把两个或者三个流动相分别配制、抽滤，然后使用仪器的在线混合功能尝试一下，多做对比，按照差异分析问题。个人觉得你们的问题在于1）流动相比例不准确2）流动相预混合不正确，理论上需要把混合的两个或者三个流动相分别配制好，然后混合在一起超声、抽滤，根据使用条件控制总量不超过10个小时，到时间之后需要重新制备。以便控制实验条件的一致性。注意同比例的2个流动相在线混合比预混合的出峰时间会晚一些。

你说的这些回头我问问领导看看尝试一下，那如果之前用剩下的流动相，当时没问题，再拿来用又出现了分裂，又会是因为什么呢

赞贴

拍砖