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主题：【讨论】分析液相洗脱梯度转制备

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Insm_592e11d
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发表于：2020/10/11 20:59:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分析型的hplc分析待纯化物质，A0.1%甲酸水，B甲醇。我先用甲醇从5%到95%跑30min，然后根据目标组分的出峰时间算出其对应的甲醇洗脱浓度。然后根据waters梯度转化器，将梯度方法换算转移到制备色谱上。按理说，在制备色谱上当甲醇浓度达到分析色谱上算得的那个浓度时该物质会被洗脱下来，但结果却是那个物质并不是在这个对应的甲醇浓度下洗脱下来，这是为什么呢。
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hujiangtao
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2020/10/12 8:55:38 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
由于管路输送溶剂需要时间，梯度洗脱有一定的延迟，一般普通HPLC大概2-3min
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welewolf
v2823651
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2020/10/12 12:16:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
理论和实际往往会有差别；建议直接在制备色谱中做几次分时段试验，然后研究出那个时间段出哪种物质，这样的结果就比较靠谱。
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2020/10/12 12:16:57 Last edit by v2823651
weiqing
weiqing1983
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2020/10/14 17:13:38 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
时间肯定会有差异，刚开始的时候需要分段采集，具体对比一下确认好收集时间。
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