实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8032421今日发帖：80 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】按EP参考浓度进样出现过载

浏览0 回复8 电梯直达
Eric494
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2021/07/05 16:31:36 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近测一个API含量，查了EP的方法，对照品进样浓度为100ug/mL，但是我按这个浓度进样出现了过载。我除了色谱柱不一样其他条件基本和EP相同(至于EP用的什么仪器我也不知道)
EP色谱柱:C18，柱长100mm，内径4.6mm，粒径3.5um;
我的色谱柱:C18，柱长150mm，内径4.6mm，粒径3.5um。
色谱图如下:
图一为100ug/mL浓度 出现过载。
图二为稀释后峰形恢复。
因此想请教一下，是什么原因导致了和药典的差异，应该怎么解决？万分感谢！
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
xiaogumd11
v3247983
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/5 18:32:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
过载出现可能 是仪器量程的不同，或是浓度过大，很多标准与实际会有差异，以实际为准，做一下方法验证（确认）报告，以后面对专家民好解释。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
lijing320323
lijing320323
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/5 21:09:10 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
咨询工程师
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 9:01:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
过载的图看不清，流动相是什么，样品是用流动相稀释的吗，如果样品没有相邻峰，柱子延长了，流速可以适当提高一点试试
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Eric494
Insm_1c26f11b
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 9:07:34 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
过载的图看不清，流动相是什么，样品是用流动相稀释的吗，如果样品没有相邻峰，柱子延长了，流速可以适当提高一点试试


不太清楚为啥这个图传上来就不清楚了，，，就是一个向前倾斜的峰，类似于直角三角形。

样品的话是流动相稀释的，流速按EP的参考已经是2.0了，可能不太好再提了??。。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 13:38:14 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Eric494(Insm_1c26f11b) 发表:

不太清楚为啥这个图传上来就不清楚了，，，就是一个向前倾斜的峰，类似于直角三角形。

样品的话是流动相稀释的，流速按EP的参考已经是2.0了，可能不太好再提了??。。
那只能归结为色谱柱的柱容量比较小了，同一类型的色谱柱，不同厂家、不同规格填料的性能不一样
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
安平
byron1111
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 15:08:26 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
        图片最好设法再处理和上传一下为好。


          原始样品的峰高有多大？ 只是存在前伸现象么？

          峰形前伸未必一定存在超载。超载的色谱峰一定峰高较强。

          建议更换一下其他型号的色谱柱实验。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Eric494
Insm_1c26f11b
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 18:46:35 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表: 那只能归结为色谱柱的柱容量比较小了，同一类型的色谱柱，不同厂家、不同规格填料的性能不一样
嗯嗯，试了几个品牌的相同参数色谱柱，也都出现了这种峰展宽、向前倾斜的过载样情况。其实感觉样品浓度并不很大，也就100ug/mL，但EP写这样做了，感觉会不会是我检测器参数上有问题呢？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Eric494
Insm_1c26f11b
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2021/7/6 18:57:41 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 安平(byron1111) 发表:                  图片最好设法再处理和上传一下为好。                    原始样品的峰高有多大？ 只是存在前伸现象么？                    峰形前伸未必一定存在超载。超载的色谱峰一定峰高较强。                    建议更换一下其他型号的色谱柱实验。
我单独传了下这个过载的图，浓度100ug/mL，峰不高，但还是出现了接近直角形状，稀释后峰型才恢复正常。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁