主题:【求助】按EP参考浓度进样出现过载

浏览0 回复8 电梯直达
Eric494
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最近测一个API含量,查了EP的方法,对照品进样浓度为100ug/mL,但是我按这个浓度进样出现了过载。我除了色谱柱不一样其他条件基本和EP相同(至于EP用的什么仪器我也不知道)
EP色谱柱:C18,柱长100mm,内径4.6mm,粒径3.5um;
我的色谱柱:C18,柱长150mm,内径4.6mm,粒径3.5um。
色谱图如下:
图一为100ug/mL浓度 出现过载。
图二为稀释后峰形恢复。
因此想请教一下,是什么原因导致了和药典的差异,应该怎么解决?万分感谢!
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xiaogumd11
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过载出现可能 是仪器量程的不同,或是浓度过大,很多标准与实际会有差异,以实际为准,做一下方法验证(确认)报告,以后面对专家民好解释。
lijing320323
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有水有渝
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过载的图看不清,流动相是什么,样品是用流动相稀释的吗,如果样品没有相邻峰,柱子延长了,流速可以适当提高一点试试
Eric494
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
过载的图看不清,流动相是什么,样品是用流动相稀释的吗,如果样品没有相邻峰,柱子延长了,流速可以适当提高一点试试


不太清楚为啥这个图传上来就不清楚了,,,就是一个向前倾斜的峰,类似于直角三角形。

样品的话是流动相稀释的,流速按EP的参考已经是2.0了,可能不太好再提了??。。
有水有渝
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原文由 Eric494(Insm_1c26f11b) 发表:

不太清楚为啥这个图传上来就不清楚了,,,就是一个向前倾斜的峰,类似于直角三角形。

样品的话是流动相稀释的,流速按EP的参考已经是2.0了,可能不太好再提了??。。
那只能归结为色谱柱的柱容量比较小了,同一类型的色谱柱,不同厂家、不同规格填料的性能不一样
安平
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        图片最好设法再处理和上传一下为好。


          原始样品的峰高有多大? 只是存在前伸现象么?

          峰形前伸未必一定存在超载。超载的色谱峰一定峰高较强。

          建议更换一下其他型号的色谱柱实验。
Eric494
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表: 那只能归结为色谱柱的柱容量比较小了,同一类型的色谱柱,不同厂家、不同规格填料的性能不一样
嗯嗯,试了几个品牌的相同参数色谱柱,也都出现了这种峰展宽、向前倾斜的过载样情况。其实感觉样品浓度并不很大,也就100ug/mL,但EP写这样做了,感觉会不会是我检测器参数上有问题呢?
Eric494
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原文由 安平(byron1111) 发表:                  图片最好设法再处理和上传一下为好。                    原始样品的峰高有多大? 只是存在前伸现象么?                    峰形前伸未必一定存在超载。超载的色谱峰一定峰高较强。                    建议更换一下其他型号的色谱柱实验。
我单独传了下这个过载的图,浓度100ug/mL,峰不高,但还是出现了接近直角形状,稀释后峰型才恢复正常。
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