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主题：【已应助】大肠杆菌发酵液样品制备

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破晓
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发表于：2021/11/11 15:20:26 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有做过GCMS，求问各位大佬大肠杆菌在m9培养基中的发酵液，高速离心过0.22μm滤膜后可不可以作为样品用以检测发酵液中的组分，如果不行的话要怎么制备样品呀，求教(仪器是安捷伦7890a-7000B*
推荐答案：歌名回复于2021/11/11
直接这样上机肯定不行啊，找个中间有机溶剂去萃取-在浓缩，最后过膜上机测试吧，直接上机水分、盐分都高，进GCMS 不合适
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mingxiaoyan
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2021/11/11 15:46:01 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
时间温度和转速对大肠杆菌都会有有影响。一般4℃，3000-4000rpm，大体积的话30分钟，小体积15分钟
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mingxiaoyan
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2021/11/11 16:02:40 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
m9培养基含有无机盐，再说体系是水溶液，这种体系经高速离心和滤膜过滤无法排除无机盐，再者水溶液一般不建议直接进质谱，可以考虑用有机溶剂萃取后再上机
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安平
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2021/11/11 16:12:58 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主想要具体测试发酵液中的那些组分呢？

有机酸？详细说说具体的要求为好。



一般情况下不建议直接进样水溶液样品。
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歌名
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2021/11/11 16:28:10 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
直接这样上机肯定不行啊，找个中间有机溶剂去萃取-在浓缩，最后过膜上机测试吧，直接上机水分、盐分都高，进GCMS 不合适
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JOE HUI
xurunjiao5339
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2021/11/11 16:40:13 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主具体要测试大肠杆菌发酵液什么成分，可以参照相关标准做前处理，直接发酵液不适合直接进气质测试。
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symmacros
jimzhu
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2021/11/11 17:01:59 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问楼主是想要测定那些项目或什么成分？
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破晓
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2021/11/11 21:19:23 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问楼主是想要测定那些项目或什么成分？
就是想看看发酵液中有哪些组分这样可以嘛？我要用大肠杆菌工程菌以葡萄糖为底物生产产物，结果HPLC没有检测到样品中的产物峰，所以老板跟我说用下GCMS检测里边到底含有哪些成分
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破晓
Ins_40f95df8
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2021/11/11 21:20:46 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 安平(byron1111) 发表:
楼主想要具体测试发酵液中的那些组分呢？

有机酸？详细说说具体的要求为好。

一般情况下不建议直接进样水溶液样品。
  就是想看看发酵液中有哪些组分这样可以嘛？我要用大肠杆菌工程菌以葡萄糖为底物生产产物，结果HPLC没有检测到样品中的产物峰，所以老板跟我说用下GCMS检测里边到底含有哪些成分，副产物应该是乙酸、乳酸之类的
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通标小菜鸟
v3141805
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2021/11/12 10:56:11 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
GCMS最好进有机溶剂的样品，其它比如水溶液，盐溶液的样品不好直接进仪器，不仅会对色谱柱造成影响，还会对离子源也造成污染。建议对样品溶液进行用有机溶剂萃取，比如二氯甲烷提取，然后取有机相上机测定分析
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安平
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2021/11/12 21:20:31 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
        如果待测物质分析方向不清楚的话，少量进样几次的话，色谱柱和检测器也是问题不大的。。。

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