最近做了三个样品的
液质分析,有些问题不明白,十分希望可以得到有经验的前辈指导!
一、背景:做单独
液相的时候,使用的是uplc,完全出峰时间为22 min;在做
LC-MS的时候,使用的hplc,测样时间为20 min。
二、样品内容:三个样品分别是未降解的药物A(一号样,TIC如附件图1)、降解反应不同时间10min的药物A及其产物(二、三号样,TIC如图2、3)
三、问题:
(1)TIC图中一个峰是否可能含有多种物质?如果是,那么该怎么判断质谱图中的小分子峰是来自于样品中原有的降解产物,还是来自于单一物质被仪器打碎后的碎片呢?(★★★这个问题最希望可以得到前辈们解答)
(2)同一个样,做
液相时会出现很多个峰(如图1),但是在做
LCMS的时候,最多只有2个峰(如图3)。以下原因是否均可能导致峰数量不同?(a)
LCMS使用的色谱柱分离度效果不佳,导致TIC图中一个峰含有多种物质(b)hplc出峰时间慢,后续还有峰没有出完
(3)按照原来推测,一二三号样品都应该出现原物质峰且RT相同,但是实际测试结果是不同样品原物质峰RT相差较大,可能的原因有哪些?
四、具体测试条件:单独
液相的柱子型号是Waters Acquity BEH C-18,1.7 μm,2.1×100 mm,流动相是10%的乙腈+90% 0.1%磷酸溶液,波长是225nm;
LC-MS的柱子型号是 安捷伦 SB-C18,1.8 μm,2.1×50 mm,流动相是10%的乙腈+90% 0.2%甲酸溶液,采用正离子扫描,波长是225nm,测样时间为20 min。